牛乳・牛肉製品の高付加価値化を目指した天然型CLAの抗がんメカニズムの解明

阐明天然CLA的抗癌机制，旨在提高牛奶和牛肉产品的附加值

基本信息

批准号：
18780204
负责人：
河原聡
金额：
$ 2.37万
依托单位：
University of Miyazaki
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

平成18年度に実施した研究結果から、天然型CLAを作用させたヒト乳がん細胞株において呼吸代謝関連酵素群の発現量が減少するという新知見を得た。このことに基づき、本年度は、細胞の呼吸に関連する酵素群の発現量を生化学的手法により測定すると共に、細胞内で産生されるアデノシン3リン酸(ATP)の量をルシフェラーゼアッセイにより測定し、乳がん細胞の呼吸代謝に及ぼす天然型CLAの影響を解析した。その結果、天然型CLAの添加により乳がん細胞株MCF-7の解糖系関連酵素群の発現量は有意に減少した。しかし、細胞内のATP量には有意な差異を認めなかった。同時に細胞内ミトコンドリア量ならびにミトコンドリアにおける呼吸基質の酸化活性についても検討を行ったが、それらにも明確な差異は認められなかった。このことから、天然型CLAは解糖系酵素群の発現量には影響を及ぼすが、それらの発現量の低下は直接細胞内のATP量に影響を及ぼすものではないことが示された。一方、天然型CLAはエストロゲンによる細胞周期関連たんぱく質であるcyclin D1およびcyclin Eの発現量を低下させることがウェスタンブロッティングにより確認された。さらに、免疫染色法による検討結果から、エストロゲンおよび天然型CLA共存下で培養した乳がん細胞内において、エストロゲン受容体の核内への移行が天然型CLAの存在により阻害されることが示された。エストロゲン受容体の核内への移行阻害がどのような機序で起こるかについてを本年度の研究において明らかにすることはできなかったが、これらの結果は、天然型CLAはエストロゲンによる増殖シグナルの核内への伝達を阻害し、核内における細胞増殖に直接関与する種々のたんぱく質の発現量の低下を介して、乳がん細胞の増殖を阻害することを強く示唆するものであった。

2006年的研究结果获得了新的发现，即用天然CLA处理的人乳腺癌细胞系中与呼吸代谢相关的酶的表达水平降低。基于此，今年我们将使用生化方法测量与细胞呼吸相关的酶的表达水平，并使用荧光素酶测定法测量细胞内产生的三磷酸腺苷（ATP）的量，分析天然CLA对呼吸的影响。乳腺癌细胞的新陈代谢。结果，添加天然CLA后，乳腺癌细胞系MCF-7中糖酵解相关酶的表达水平显着降低。然而，细胞内 ATP 的量没有观察到显着差异。同时，我们还检测了细胞内线粒体的数量以及线粒体中呼吸底物的氧化活性，但没有观察到明显的差异。这表明虽然天然CLA影响糖酵解酶的表达水平，但这些表达水平的降低并不直接影响细胞中ATP的量。另一方面，Western blotting证实天然CLA会降低雌激素诱导的细胞周期相关蛋白cyclin D1和cyclin E的表达水平。此外，免疫染色研究的结果表明，在雌激素和天然CLA共存培养的乳腺癌细胞中，天然CLA的存在抑制了雌激素受体向细胞核的易位。尽管今年的研究不可能阐明抑制雌激素受体易位进入细胞核的机制，但这些结果表明天然 CLA 抑制雌激素诱导的增殖信号进入细胞核，这强烈表明乳腺癌细胞增殖受到抑制。通过抑制内部传输并降低直接参与细胞核内细胞增殖的各种蛋白质的表达水平来抑制。