大理石骨病の病態モデルにおける破骨細胞の骨吸収機能と分化に関する研究

石骨病病理模型中骨吸收功能及破骨细胞分化的研究

基本信息

批准号：
07771605
负责人：
豊澤悟
金额：
$ 0.64万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

大理石骨病は破骨細胞の増殖・分化、あるいは機能の異常により骨の改造現象が阻止され、骨変形や骨髄腔の狭小化などを伴う遺伝疾患である。本病態モデル中のoc/ocマウスは破骨細胞形成は行われるが、波状縁がなく骨吸収能を欠いており、破骨細胞の機能に欠陥があるとされている。我々はこのoc/ocマウスの破骨細胞の骨吸収能について、電顕形態学的に、または免疫組織学的に、様々な点から異常を検索してきた。最近、遺伝子遺伝子ターゲッティングにより細胞内情報伝達チロシンキナーゼをコードするc-src遺伝子を完全に欠失させると破骨細胞の波上縁がなく骨吸収能を欠くという報告があり、oc/ocマウスで同様の異常が起こっている可能性が考えられ、c-src遺伝子関連蛋白質であるpp60c-srcの発現の有無を免疫染色にて検討したが、異常は見られなかった。また、正常骨組織では、破骨細胞は炭酸脱水酵素アイソザイムII(CAII)の触媒作用により、H_2OとCO_2から、H^+とHCO_3が産生される。HCO_3は破骨細胞のbasolateral membraneからANION EXCHANGERによって放出され、Hは波状縁上のH^+-ATPaseによってハウシップ吸収窩に分泌され、脱灰が行われるが、これら因子のどれが欠けても上記化学平衡が乱れ、ハウシップ吸収窩へのH供給が停止する。そこで、まずマウスCAIIに対する抗体を作り免疫染色により破骨細胞を同定してみた。その結果、oc/ocマウスの破骨細胞にもCAII陽性反応が見られた。また、CAIIのmRNAに対するin situ hybridizationでも破骨細胞にシグナルの発現を認めた。さらに平成7年度科学研究費補助金にてANION EXCHANGER、およびH-ATPaseに対する抗体を作成し、免疫染色を行ったところ、oc/ocマウスの破骨細胞の細胞膜にも陽性反応を認め(未発表)、現在、各抗体の細胞膜局在を電顕レベルで検討中である。以上の如く、oc/ocマウスの破骨細胞はハウシップ吸収窩へのH供給、すなわち骨脱灰能を有していると思われる。

骨石症是一种由于破骨细胞增殖、分化或功能异常而导致骨重塑受到抑制，导致骨变形和骨髓腔狭窄的遗传性疾病。尽管这种疾病模型中的oc/oc小鼠形成了破骨细胞，但它们缺乏波状边缘并且缺乏骨吸收能力，表明破骨细胞功能存在缺陷。我们一直从电子显微镜形态学和免疫组织学等多个角度寻找这些 OC/OC 小鼠破骨细胞骨吸收能力的异常。最近有报道称，当通过基因打靶完全删除编码细胞内信号转导酪氨酸激酶的c-src基因时，破骨细胞缺乏波纹边缘，缺乏骨吸收能力，oc/oc小鼠被认为可能也发生了类似的异常，通过免疫染色检查了c-src基因相关蛋白pp60c-src的表达有无，但没有发现异常。此外，在正常骨组织中，破骨细胞通过碳酸酐酶同工酶II（CAII）的催化作用，由H_2O和CO_2产生H^+和HCO_3。 HCO_3由破骨细胞基底外侧膜上的阴离子交换器释放，H+通过波状边缘的H^+-ATPase分泌到Howship吸收窝中，导致脱矿质，化学平衡被扰乱，H+供给Howship吸收。空腔停止。因此，我们首先创建了针对小鼠 CAII 的抗体，并使用免疫染色来鉴定破骨细胞。结果，在oc/oc小鼠的破骨细胞中也观察到CAII阳性反应。此外，CAII mRNA 的原位杂交揭示了破骨细胞中的信号表达。此外，当我们在1995年利用科学研究资助金制作针对ANION EXCHANGER和H-ATPase的抗体并进行免疫染色时，在OC/OC小鼠的破骨细胞细胞膜中也观察到阳性反应（未发表）。），我们目前正在电子显微镜水平上研究每种抗体的细胞膜定位。如上所述，OC/OC 小鼠的破骨细胞似乎具有向 Howship 吸收窝提供 H 的能力，即使骨脱矿质。