ツベロン酸グルコシルトランスフェラーゼの精製、及びその生理的作用の解明

块菌酸葡萄糖基转移酶的纯化及其生理作用的阐明

基本信息

批准号：
06J04504
负责人：
瀬戸義哉
金额：
$ 1.79万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2008
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06J04504/
关键词：
ツベロン酸グルコシドツベロン酸ジャスモン酸ツベロン酸グルコシルトランスフェラーゼサリチル酸グルコシルトランスフェラーゼ傷害ストレス UDP-glucose非依存型グルコシルトランスフェラーゼグルコシルトランスフェラーゼ

项目摘要

本研究はツベロン酸(12-ヒドロキシジャスモン酸、TA)にグルコースを転移しツベロン酸グルコシド(TAG)を生成するグルコシルトランスフェラーゼを同定しその生理的作用を解明することによりTAGの機能を解明することを目的として行った。昨年度の研究においてイネの培養細胞から見出したツベロン酸グルコシルトランスフェラーゼはサリチル酸グルコシルトランスフェラーゼ(OsSGT)と同定された。OsSGTの諸性質の解析等の研究成果については学術論文としてphytochemistry誌に発表した。また、本年度の研究においてはタバコにおけるOsSGTのオルソログであるNtSGTもTAに対して活性を有するのではないかという仮説の元、大腸菌によって発現させたNtSGTを用いて解析を行った。その結果、NtSGTもTAに対して活性を有するということを明らかとした。さらに、NtSGTの遺伝子発現は病害ストレスにより誘導されることが報告されていたが、OsSGT同様傷害ストレスによっても誘導されることが明らかとなった。また、詳細な解析には至らなかったがタバコのNtSGT/RNAi変異体の作成も行った。さらに、TAに対する特異性のより高い別のグルコシルトランスフェラーゼが存在するのではないかと考え、UDP-Glucose非依存型グルコシルトランスフェラーゼの探索を試みた。その結果、イネ培養細胞中にオクチルグルコシドを糖供与体に用いる珍しいタイプのTAグルコシルトランスフェラーゼを見出すことに成功し、本酵素を精製しグルコシダーゼ様のタンパク質と同定した。このよ引こTAやTAGの詳細な機能解明のために必要となるTAグルコシルトランスフェラーゼを初めて見出すことに成功した。今後変異体の解析など更なる研究の発展が必要であるが、これらの化合物の機能解明に繋がる重要な知見が得られたと考えられる。

这项研究是通过鉴定葡萄糖基转移酶来阐明TAG功能，葡萄糖基转移酶产生葡萄糖（TAG），该糖苷（TAG）会产生葡萄糖对Tsveronic Acid（12-羟基壳酸，TA），并阐明了其生理效应。在去年的研究中，从水稻培养细胞中发现的Gluco sultzlansferase被鉴定为葡萄糖苏尔申术酶（OSSGT）。研究结果，例如对OSSGT的各种特性的分析，已在植物化学中发表为学术论文。在今年的研究中，使用NTSGT分析了ntsgt的NTSGT，它是基于TA可能活跃的假设，使用了Escherichia Coli表达的NTSGT。结果，NTSGT还揭示了TA是活跃的。此外，据报道，NTSGT的基因表达是由于疾病胁迫而诱导的，但也是由OSSGT等损伤应激诱导的。此外，我们没有进行详细的分析，而是创建了烟草NTSGT/RNAi突变体。此外，他认为还有另一个具有较高特异性的葡萄糖粉淤泥转移酶，并试图搜索UDP-葡萄糖非依赖性葡萄糖转移酶。结果，我们成功地找到了一种不寻常的TA葡萄糖基转移酶，该葡萄糖基转移酶在水稻培养细胞中使用章鱼的糖含量，净化该酶并将其鉴定为葡萄糖酶的蛋白质。我成功地找到了第一个TA葡萄糖转移酶，以阐明该拉动TA和TAG的详细功能。将来需要进一步的研究，例如对变体的分析，但是人们认为已经获得了重要的知识来阐明这些化合物的功能。