ニューカッスル病ウイルス及びトリインフルエンザウイルスの迅速診断法・制御法の開発

新城疫病毒和禽流感病毒快速诊断和控制方法的建立

基本信息

批准号：
06F06224
负责人：
大橋和彦
金额：
$ 1.92万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06F06224/
关键词：
ニューカッスル病 LAMP法

项目摘要

ニューカッスル病(ND)は、NDウイルス(NDV)の感染により起こる鶏の急性感染症であり、養鶏産業に甚大な損害を与える。NDは生および不活化ワクチン接種で予防されているが、現在でも世界各地で発生が報告されており、発生時には迅速な診断や病原型の決定が重要となってくる。そこで本研究では、これまで日本各地で種々の鳥類から分離されたNDV株の遺伝子解析を行い、分離時期、鳥類種、あるいは分離場所などと遺伝子型の相関を解析し、さらに新規診断法の開発を目的として、LAMP法やPCR法など迅速診断法として有用な方法を検討した。昨年度は、過去に日本国内で分離されたNDV株のM遺伝子の塩基配列を元に系統樹解析を行い、1970年代以前の分離株と1980年代以降の分離株の2つのグループに分かれることが示した。またF遺伝子を標的としたLAMP法を樹立してND迅速診断への応用を詳細に検討した。その結果、日本で分離されているNDV38株全てでF遺伝子を検出し、NDV診断法として応用可能であることを示した。今年度は、NDVに抗ウイルス効果を示す物質を探索するシステムを樹立するため、日本国内で分離されたNDV株のF遺伝子の塩基配列を解析して、その中でもF蛋白の機能に重要なcoiled-coil motif部分の構造を詳細に解析した。その結果、強毒株と弱毒株で異なるアミノ酸置換がF蛋白の構造に影響を与えることが予想された(コンピューターによる解析、BioEdit program等を使用)。今後、培養細胞を用いたF蛋白の機能を解析することで、この方法の有用性を証明することが必要である。また他のウイルス蛋白(P蛋白など)にも応用する予定である。

新城疫（ND）是由新城疫病毒（NDV）感染引起的鸡的急性传染病，对养禽业造成重大损害。尽管新城疫可以通过接种活疫苗和灭活疫苗来预防，但世界许多地区仍报告有新城疫暴发，当暴发发生时，及时诊断和确定病原类型非常重要。因此，本研究对日本各地不同鸟类分离的NDV毒株进行了遗传分析，分析了基因型与分离时间、鸟类种类、分离地点的相关性，并开发了新的诊断方法为此，我们研究了可用作快速诊断方法的方法，例如LAMP法和PCR法。去年，我们根据日本先前分离的NDV毒株的M基因核苷酸序列进行了系统发育树分析，发现它们可以分为两类：20世纪70年代之前分离的毒株和20世纪80年代之后分离的毒株。我们还建立了针对F基因的LAMP方法，并详细研究了其在快速ND诊断中的应用。结果，在日本分离的全部38株NDV毒株中均检测到F基因，表明该方法可作为NDV诊断方法。今年，为了建立一个系统来寻找对NDV具有抗病毒作用的物质，我们将分析日本分离的NDV毒株的F基因的碱基序列 - 详细分析线圈基序部分的结构。结果，预测高毒株和减毒株之间的不同氨基酸取代会影响F蛋白的结构（使用BioEdit程序等的计算机分析）。未来，有必要通过使用培养细胞分析F蛋白的功能来证明该方法的实用性。我们还计划将其应用于其他病毒蛋白（例如P蛋白）。