不死化エナメル芽細胞株を用いた歯の再生医療に関する基礎的研究

利用永生化成釉细胞系进行牙齿再生医学的基础研究

• 批准号: 18791477
• 负责人: 中田 憲
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Akita University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18791477/
• 关键词: エナメル芽細胞; 上皮一問葉相互作用; Scaffold; Signa1; 歯再生; 上皮-間葉相互作用; scaffold; signal

●エナメル芽細胞の分化誘導条件の検討(1)申請者は,マウス胎仔の歯胚からエナメル芽細胞を分離・培養し,エナメル芽細胞株の樹立に成功している.エナメル芽細胞株は,培養系で石灰化した結節を形成し,ラミニンを主体とした基底膜成分の調整品であるマトリゲルをscaffoldとしてヌードマウスの皮下に移植すると,自ら基質形成期エナメル芽細胞に分化してエナメル器様組織を形成する.移植した細胞株は,エナメル芽細胞のマーカー(アメロジェニン)を発現し,移植後20週でレントゲン不透過性が観察された.さらに移植後40週で,レントゲン不透過性の亢進がみられた.(2)歯再生用のscaffoldとして水酸アパタイト(HAP)と炭酸アパタイト(CO_3-AP)が有用か否かを検討するめ,本細胞株をアパタイト上で培養し,エナメル芽細胞の増殖および分化に与える影響を検討した.HAP上で培養したエナメル芽細胞は,7日目以降に増殖し,3週後では培養皿と差がなかった.また,エナメル芽細胞はHAP上で成熟したエナメル芽細胞の分化マーカーを新たに発現した.以上により,マトリゲルとHAPは歯再生のscaffoldとして利用できる可能性が示唆された.●特殊コラーゲン膜を用いたエナメルマトリックス誘導に関する検討エナメル質を再生するには,上皮一間葉相互作用が必須と考えられる.その上皮一間葉相互作用を再現するため,コラーゲン膜をin vitroにおけるscaffoldに選択した.このコラーゲン膜は特殊なバブル処理で通気孔を変更でき,エナメル芽細胞株と当教室で樹立した不死化象牙芽細胞株の両面培養に最適な通気孔の大きさは15umであった.現在,コラーゲン膜に歯の形態を付与することによって,歯の形を再現できるか否かを検討中である.

●研究诱导原素细胞分化的条件（1）申请人已从小鼠胎儿的牙齿胚芽中分离出和培养的烯素母细胞，并成功地建立了陶器母细胞系。牙能生物线在培养系统中形成钙化结节，并且将基于层粘连蛋白的地下膜成分Matrigel植入为支架时，它被区分为底物形成的搪瓷细胞并形成搪瓷样组织。植入的细胞系表达了原素母细胞（amelogenin）的标记，并在植入后20周观察到X射线不渗透。此外，在植入后40周时，X射线不渗透性增加。 （2）羟基磷灰石（H）作为牙齿再生的支架，以研究AP）和碳酸盐磷灰石（CO_3-AP）是否有用，我们在磷灰石上培养了该细胞系，并研究了对搪瓷爆发的增殖和分化的影响。第7天后培养在HAP上培养的搪瓷爆炸，与培养皿相比，在3周后与培养皿没有区别。此外，搪瓷爆炸在HAP上表达了成熟的搪瓷爆炸的新分化标记。这表明Matrigel和Hap可以用作牙齿再生的支架。 ●研究使用特殊的胶原膜上皮间质相互作用的牙釉质基质诱导的研究被认为对于再生牙釉质必不可少。为了再现上皮间质相互作用，注入了胶原蛋白膜。我们选择了这种胶原蛋白膜以特殊的气泡处理来改变排气孔，以及在我们教室中建立的牙釉质爆炸细胞系和永生化的odontoblast细胞系的最佳排气尺寸均为15UM。我们目前正在考虑是否可以通过向胶原膜上添加牙齿形态来再现牙齿的形状。

项目成果

Development of regenerative therapy for the tooth using cell lines derived from tooth germs: transplantation of ameloblast-lineage cells into subcutaneous tissue of nude mouse.

使用牙胚细胞系开发牙齿再生疗法：将成釉细胞系细胞移植到裸鼠的皮下组织中。

• 发表时间: 2007
• 作者: Akira;KAKATA;Hirokazu;NAGAI;Youichi;IWANAMI;Hiroshi;TAKANO;Masayuki;FUKUDA;Youji;MIYAMOTO
• 通讯作者: MIYAMOTO

Evaluation of a Combination Chemotherapy with TS-1 and Docetaxel for patients with Oral Squamous Cell Carcinomas

TS-1 和多西紫杉醇联合化疗对口腔鳞状细胞癌患者的评价

• 发表时间: 2007
• 期刊: Gan To Kagaku Ryoho 34(13)
• 作者: Nakata;A.;Fukuda;M.;Iwanami;Y.;Ito;H.;Takano;H.;Nagai;H.;Nanjo;H.;Miyamoto;Y.
• 通讯作者: Y.

歯由来細胞株を用いた歯の再生医療の開発第3報:ヌードマウス皮下へのエナメル芽細胞の移植

牙源细胞系牙齿再生医学发展第三期报告：裸鼠成釉细胞皮下移植

• 发表时间: 2007
• 作者: Takahashi S;Kawashima N;Sakamoto K;Nakata A;Kameda T;Sugiyama T;Katsube K;Suda H.;中田憲・永井宏和・岩波洋一・高野裕史・福田雅幸・宮本洋二
• 通讯作者: 中田憲・永井宏和・岩波洋一・高野裕史・福田雅幸・宮本洋二

Differentiation of an ameloblast-lineage cell line (ALC) is induced by Sonic hedgehog signaling

• DOI: 10.1016/j.bbrc.2006.12.053
• 发表时间: 2007-02-09
• 期刊: BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS
• 影响因子: 3.1
• 作者: Takahashi, Satomi;Kawashima, Nobuyuki;Suda, Hideaki
• 通讯作者: Suda, Hideaki

歯由来細胞株を用いた歯の再生医療の開発第2報:象牙芽細胞株の樹立とハイドロキシアパタイトのスキャホールドとしての有用性

关于利用牙源细胞系进行牙齿再生医学发展的第二份报告：成牙本质细胞系的建立以及羟基磷灰石作为支架的用途

• 发表时间: 2007
• 作者: Takahashi S;Kawashima N;Sakamoto K;Nakata A;Kameda T;Sugiyama T;Katsube K;Suda H.;中田憲・永井宏和・岩波洋一・高野裕史・福田雅幸・宮本洋二;中田憲・永井宏和・岩波洋一・高野裕史・福田雅幸・宮本洋二
• 通讯作者: 中田憲・永井宏和・岩波洋一・高野裕史・福田雅幸・宮本洋二