腸管上皮細胞の補体産生能と補体制御蛋白発現におけるサイトカイン制御機構の解明

阐明肠上皮细胞补体产生能力和补体调节蛋白表达的细胞因子控制机制

基本信息

批准号：
06770363
负责人：
安藤朗
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Shiga University of Medical Science
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06770363/
关键词：
サイトカイン補体腸管上皮細胞

项目摘要

本研究は、腸管上皮細胞における補体成分(C3,C4,factorB)の産生と補体制御蛋白decay acceralating factor(DAF)発現の総合的サイトカイン制御機構を明らかにすることを目的として開始した。腸管局所において上皮細胞に由来する補体蛋白は、上皮細胞自身にも細胞障害性に働くと考えられるが、上皮細胞はそのapical surface DAFを発現することにより補体成分の活性化から自身を防御していると考えられる。本年度の研究により、我々は腸管上皮細胞における補体成分産生とDAF発現の総合的サイトカイン制御について、蛋白およびmRNA発現レベルの検討を行った。今回の検討を開始するに当たり、まず、ヒト血管内上皮細胞のtotal RNAからヒトDAF cDNAをcloningし、その塩基配列を決定、ヒトDAF cDNA probeを作成した。本年度の研究において、我々は、IL-4に特異的な補体活性化からの防御機転誘導作用を見い出した。すなわち、IFN-γは腸管上皮細胞からのC4,factorBの産生を誘導するが、IL-4はこの補体産生誘導効果を濃度依存性に抑制した。さらに、補体制御蛋白DAFの発現に対しては、IL-4は濃度依存性にその発現を増強した。これらのIL-4の効果はmRNAレベルでも確認され、しかも、pretranslationな段階での制御であった。これらの知見は、腸管局所においてIL-4が異なった機序により、上皮細胞を自身に由来する補体成分の活性化から防御していることを示唆する。すなわち、IL-4は、(1)補体成分の産生をnegativeに制御し補体の過剰活性化を抑制し、(2)補体制御蛋白の発現増強により上皮細胞上での補体の学的にかを抑制している。これらの補体活性化からの防御機転は、他の細胞での報告も見られず、IL-4の新たな抗免疫炎症作用と考えられる。今回我々の見い出したIL-4による補体活性化の制御機構の異常が、病因が未だ明らかにされていない潰瘍性大腸炎の病態に関与している可能性が示唆され、現在検討中である。

本研究的目的是阐明肠上皮细胞中补体成分（C3、C4、B因子）产生和补体调节蛋白衰变加速因子（DAF）表达的综合细胞因子控制机制。源自肠道上皮细胞的补体蛋白被认为对上皮细胞本身具有细胞毒性作用，但上皮细胞通过表达其顶端表面 DAF 来保护自身免受补体成分的激活。在今年的研究中，我们研究了肠上皮细胞中补体成分产生和 DAF 表达的综合细胞因子调节的蛋白质和 mRNA 表达水平。为了开始这项研究，我们首先从人血管上皮细胞的总RNA中克隆了人DAF cDNA，确定了其碱基序列，并创建了人DAF cDNA探针。在今年的研究中，我们发现IL-4对于诱导补体激活的防御机制具有特定作用。也就是说，IFN-γ诱导肠上皮细胞产生C4（B因子），但IL-4以浓度依赖性方式抑制这种补体产生诱导作用。此外，IL-4以浓度依赖性方式增强补体调节蛋白DAF的表达。 IL-4的这些作用也在mRNA水平上得到证实，而且它们在翻译前阶段受到调节。这些发现表明，IL-4 通过肠道中的不同机制保护上皮细胞免受其自身补体成分的激活。换句话说，IL-4（1）负向控制补体成分的产生并抑制补体过度激活，并且（2）增强补体调节蛋白的表达以改善上皮细胞上补体的动态。这些针对补体激活的防御机制尚未在其他细胞中报道过，被认为是IL-4的一种新的抗免疫和炎症作用。我们发现的IL-4补体激活调节机制的异常可能与溃疡性结肠炎的病理有关，但其原因尚不清楚，目前正在研究中。