生体内神経前駆細胞におけるp27Kip1の分化誘導機能に関する研究

p27Kip1体内神经祖细胞分化诱导功能的研究

基本信息

批准号：
17790723
负责人：
三橋隆行
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Keio University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17790723/
关键词：
神経前駆細胞大脳皮質発生分化誘導細胞周期 p27Kip1 マウス

项目摘要

CDK抑制遺伝子p27Kip1は増殖抑制・分化誘導に重要な細胞周期調節蛋白である。神経前駆細胞では大脳皮質発生が進むに従い核内p27Kip1蛋白が増加、分化後の神経細胞で発現が高値となる。また、P27Kip1欠損マウス(P27KO)では、大脳皮質が約10%肥厚することが報告されている(Goto et al.,2004)。本年度は、p27KO大脳皮質の肥厚化は、神経前駆細胞の細胞分裂動態が変化した結果である、という作業仮説のもと、以下の実験を行った。方法1.妊娠16日(E16)のp27KOおよび野生型胎児にS期特異的トレーサーであるBrdUを継続的に曝露し、細胞周期各相の長さを計測した。2.E16のp27KOおよび野生型胎児にS期特異的トレーサーlrdUとBrdUを2時間の時間差をもって曝露し、細胞周期を離脱した細胞数を計測した。2.E16胎児に一回lrdUを曝露し、出生後21日目(P21)大脳皮質内のlrdU陽性GABA陰性ニューロンの位置と数を計測した。結果 1.E16の神経前駆細胞のG1期がp27KOにおいて約2時間減少した。2.神経前駆細胞のうち細胞周期を離脱した細胞数が約50%増加した。3.E16で産生されたlrdU陽性GABA陰性投射ニューロンは大脳皮質表層のII-IV層に分布した。p27KOでは野生型と比較し上記細胞が14%増加した。考察 p27KOでは大脳皮質発生初期に分化誘導の確率(Q値)が減少することが判明している(Goto et al.,2004)。今年度の研究結果より、初期のQ値が減少することにより神経前駆細胞プールが増加、発生後期にQ値が増加することで最終的に大脳皮質表層の投射ニューロンが増加する可能性を明らかにした。

CDK抑制基因P27KIP1是一种细胞周期调节蛋白，对增殖抑制和分化诱导很重要。在神经期细胞中，随着大脑皮质的发生的增加，核P27 KIP1蛋白会增加，并且在下午神经细胞中表达很高。此外，据报道，P27KIP1缺失小鼠（P27KO）将大脑皮层增加约10％（Goto等，2004）。今年，基于工作假设进行以下实验，即p27ko大脑皮层的肥大是神经细胞细胞分裂的结果。方法1。妊娠16号的P27KO和野生胎儿的野生胎儿不断暴露S特异性示踪剂BRDU，以测量每个细胞周期的长度。 2。E16P27KO和野生胎儿暴露于S特异性的示踪剂LRDU和BRDU，其时间差为2小时，并测量了从细胞周期撤回的细胞数量。 2。E16一次暴露于胎儿，出生后第21天（P21）测量了LRDU阳性GABA阴性神经元的位置和数量。结果，在P27KO中，E16的神经保护细胞的G1相减少了约2小时。 2。离开神经细胞细胞周期的细胞数量增加了约50％。 3。在E16中产生的LRDU阳性GABA负无线电神经元分布在脑皮质表面层的II-IV层中。在P27KO中，与野生型相比，上述细胞增加了14％。考虑p27KO发现，分化诱导（Q值）的概率（Q值）在大脑皮层的早期阶段降低（Goto等，2004）。显然，今年的研究结果可能会随着初始Q值的降低而增加神经主体细胞池的数量，并且Q值的数量在晚期发生，最终增加了大脑皮层表面的投射神经元。