ヒト制御性樹状細胞に特異的に発現するT細胞機能制御分子の同定と機能解析

人调节性树突状细胞特异表达的T细胞功能控制分子的鉴定和功能分析

基本信息

批准号：
17790334
负责人：
佐藤克明
金额：
$ 2.18万
依托单位：
The Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

本課題では、ヒト制御性樹状細胞(regulatory dendritic cells ; DC_<reg>)に特異的に発現する分子の同定と機能解析を行うことにより、DC_<reg>のT細胞制御機能の作用機序を解明することを主眼とした。本年度の研究計画と現在までに得られた研究結果は以下の通りである。1.DC_<reg>の遺伝子発現プロファイルの検索GeneChipプローブアレイを用いて、ヒト成熟樹状細胞(mature DCs ; mDCs)とヒトDC_<reg>間での差次的遺伝子発現プロファイルについて検討を行った。その結果、約47.000遺伝子産物中においてヒトmDCsの方がヒトDC_<reg>よりも発現が高い遺伝子数は2,103で、その内、細胞膜分子数が127、免疫関連分子数が118、転写因子数が223であった。一方、ヒトDC_<reg>の方がヒトmDCsよりも発現が高い遺伝子数は2,602で、その内、細胞膜分子数が181、免疫関連分子数が67、転写因子数が112であった。2.ヒトDC_<reg>特異的遺伝子発現の解析得られた差次的遺伝子群の中で免疫グロブリン様ドメインを有する細胞膜分子がDC_<reg>において機能分子として作用することを予想し、CD200受容体類似分子(similar CD200 receptor ; sCD200R)を選択した。DC_<reg>はmDCsと比較してsCD200Rの発現がGeneChipプローブアレイ解析では約500倍、リアルタイムPCR解析では約750倍認められ、さらにsCD200Rは他の免疫細胞ではほとんど発現が認められなかった。これらのことから、sCD200RはDC_<reg>において特異的な発現が認められる機能分子であることが推察された。3.抗ヒト制御性樹状細胞特異的分子抗体の作製sCD200Rペプチドを実験動物に免疫して、抗sCD200R抗体を作製し、現在発現解析中である。

在本项目中，我们将鉴定并功能分析人类调节性树突状细胞（DC_<reg>）中特异表达的分子，以阐明DC_<reg>的T细胞调节功能的作用机制。今年的研究计划和迄今为止取得的研究成果如下。 1. 搜索 DC_<reg> 的基因表达谱使用 GeneChip 探针阵列，我们研究了人类成熟树突状细胞 (mDC) 和人类 DC_<reg> 之间的差异基因表达谱。结果，在约47,000个基因产物中，在人mDC中表达高于人DC_<reg>的基因数量为2,103个，其中细胞膜分子127个，免疫相关分子118个，转录因子118个。当时是 223。另一方面，在人DC_<reg>中比在人mDC中表达更高的基因数量为2,602个，其中181个是细胞膜分子，67个是免疫相关分子，112个是转录因子。 2.人类DC_<reg>特异性基因表达分析在获得的差异基因组中，我们预测具有免疫球蛋白样结构域的细胞膜分子将充当DC_<reg>中的功能分子（类似CD200受体； sCD200R）被选中。与mDC相比，DC_reg>在GeneChip探针阵列分析中表达大约500倍的sCD200R，在实时PCR分析中表达大约750倍，并且在其他免疫细胞中几乎没有观察到sCD200R的表达。从这些结果推断sCD200R是在DC_<reg>中特异性表达的功能分子。 3.抗人调节树突状细胞特异性分子抗体的制备我们用sCD200R肽免疫实验动物，产生抗sCD200R抗体，目前正在分析其表达情况。