ファンコニ貧血遺伝子FA-D2と家族性乳ガン遺伝子Brca2との相互作用の再検討

范可尼贫血基因FA-D2与家族性乳腺癌基因Brca2相互作用的重新审视

基本信息

批准号：
17790218
负责人：
北尾洋之
金额：
$ 2.24万
依托单位：
Hiroshima University (2006)Kawasaki Medical School (2005)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

ファンコニ貧血(FA)は進行性の骨髄不全や好発ガン性を示す遺伝性疾患で、現在までに13の相補群(FA-A, B, C, D1, D2, E, F, G, 1, J, L, M, N)が知られていて、そのうち1を除く12の原因遺伝子が同定されている。そのうちFA-A, B, C, E, F, G, L, Mは核内でFAコア複合体を形成しており、FA-D2のモノユビキチン化に必須の役割を果たす。それに対しFA-D1変異細胞では、FA-D2のモノユビキチン化が正常である。FA-D1原因遺伝子が家族性乳がん遺伝子BRCA2と同一であることが報告され、FA-D2のモノユビキチン化を介するFA経路とBRCA2との機能的連携が示唆されたが、その具体的なメカニズムは不明であった。BRCA2は相同組換え修復過程における必須因子Rad51の機能を制御することが知られており、BRCA2変異細胞ではRad51のDNA損傷刺激後の核内フォーカス形成やクロマチン移行に異常が見られる。まず、我々はニワトリB細胞DT40のFA-CやFA-D2変異細胞やヒトFA-D2変異細胞PD20を用いて、内在性Rad51のDNA損傷刺激後のフォーカス形成やクロマチン移行を解析したが、野生型との差が認められなかった。我々はさらにニワトリB細胞DT40を用いて、FA-CおよびBRCA2変異株、さらにFA-C/BRCA2 2重変異株を樹立し、遺伝学的な解析を行った。その結果、FA-C/BRCA22重変異株は電離放射線に対してBRCA2変異株と同等の感受性を示したが、DNA鎖間架橋剤に対しては、FA-CおよびBRCA2変異株より強い感受性を示すことを見いだした。これらのことから、BRCA2はFA-D2のモノユビキチン化を介するFA経路とは独立に活性化すること、さらにDNA2重鎖切断修復においてはFA経路とBRCA2は同一経路で機能しているが、DNA鎖間クロスリンク修復に対してはそれぞれ独立した機能を持つことが明らかになった。

范可尼贫血 (FA) 是一种导致进行性骨髓衰竭和癌症高发的遗传性疾病，已确定 12 个致病基因（其中一个除外）。其中，FA-A、B、C、E、F、G、L和M在细胞核中形成FA核心复合物，并在FA-D2的单泛素化中发挥重要作用。相反，FA-D2 单泛素化在 FA-D1 突变细胞中是正常的。据报道，FA-D1致病基因与家族性乳腺癌基因BRCA2相同，表明FA途径与BRCA2之间通过FA-D2的单泛素化实现功能性协同，但具体机制尚不清楚。已知 BRCA2 控制 Rad51 的功能，Rad51 是同源重组修复过程中的一个重要因素，在 Rad51 刺激 BRCA2 突变细胞中的 DNA 损伤后，观察到核灶形成和染色质迁移异常。首先，我们使用鸡B细胞DT40 FA-C和FA-D2突变细胞以及人FA-D2突变细胞PD20分析了DNA损伤刺激后内源性Rad51的病灶形成和染色质迁移，没有观察到两种类型之间的差异。我们进一步利用鸡B细胞DT40建立了FA-C和BRCA2突变株，以及FA-C/BRCA2双突变株，并进行了遗传分析。结果，FA-C/BRCA2双突变株表现出与BRCA2突变株相同的对电离辐射的敏感性，但它对DNA链间交联剂比我发现的FA-C和BRCA2突变株更敏感。要展示的东西。这些结果表明，BRCA2独立于介导FA-D2单泛素化的FA途径而被激活，并且FA途径和BRCA2在DNA双链断裂修复中以相同途径发挥作用；并且已经揭示，FA途径和BRCA2在DNA双链断裂修复中各自具有独立的功能。链间交叉链接修复。