血液網膜関門薬物排出輸送を制御する分子機構の解明

阐明控制血视网膜屏障药物流出和转运的分子机制

基本信息

批准号：
17790116
负责人：
登美斉俊
金额：
$ 2.24万
依托单位：
University of Toyama
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17790116/
关键词：
内側血液網膜関門輸送担体網膜排出輸送有機アニオン Oatp2 Oat3

项目摘要

本研究は血液網膜関門(BRB)には多様な異物排出機構が存在し、薬物の網膜移行性や網膜内老廃物の除去に機能していることを証明することを目的とした。[^3H]estradiol 17-β glucuronide (E17βG)もしくは[^3H]dehydroepiandrosterone sulfate (DHEAS)と、bulk flowマーカーとして[^<14>C]D-mannitolを同時に硝子体内に投与し、microdialysisプローブを用いて投与化合物の硝子体内濃度推移を測定し、BRBを介した排出輸送を評価した。[^3H]E17βGおよび[^3H]DHEASの硝子体からの消失速度定数は[^<14>C]D-mannitolよりも約2倍高く、E17βGおよびDHEASはBRBを介して排出されていることが示唆された。[^3H]E17βGおよび[^3H]DHEASの消失は各々非標識E17βGとDHEASで自己阻害された。さらに、[^3H]E17βGおよび[^3H]DHEASの消失はsulfobromophthaleinおよびprobenecid存在下、およびorganic anion transporting polypeptide 2(oatp2)特異的な基質であるdigoxin存在下で有意に阻害された。磁気分離したラット網膜血管内皮細胞画分におけるmRNA発現量を解析した結果、oatp2および14の内側BRBにおける発現が示された。さらに、網膜血管内皮細胞画分を用いた解析および免疫組織化学解析の結果、内側BRBの網膜側膜にはorganic anion transporter (oat) 3の発現が示された。以上の結果から、内側BRBにはoatp2、oatp14、およびoat3が発現し、さらに少なくともoatp2はBRBを介したE17βGおよびDHEAS排出輸送に関与していることを示唆することができた。

本研究的目的是证明血视网膜屏障（BRB）具有多种排出异物的机制，并在药物的视网膜迁移和视网膜内废物的清除中发挥作用。将[ 3 H]雌二醇17-β葡糖苷酸(E17βG)或[ 3 H]硫酸脱氢表雄酮(DHEAS)和作为整体流动标记物的[ 14 C]D-甘露醇同时玻璃体内施用，并使用微透析探针。测量所施用化合物的玻璃体内浓度的时间过程，并评估BRB介导的排泄转运。 [^ 3 H]E17βG和[^ 3H]DHEAS从玻璃体的消失速率常数比[^ 14 C]D-甘露醇的消失速率常数高大约两倍，表明E17βG和DHEAS通过BRB排泄。建议。 [^3H]E17βG 和 [^3H]DHEAS 的消失分别被未标记的 E17βG 和 DHEAS 自抑制。此外，在磺溴酞和丙磺舒以及地高辛（有机阴离子转运多肽2（oatp2）的特异性底物）存在下，[^3H]E17βG和[^3H]DHEAS的消失被显着抑制。对磁力分离的大鼠视网膜血管内皮细胞组分中 mRNA 表达水平的分析揭示了内部 BRB 中 oatp2 和 14 的表达。此外，使用视网膜血管内皮细胞组分和免疫组织化学分析揭示了内部BRB的视网膜膜中有机阴离子转运蛋白（OAT）3的表达。上述结果表明oatp2、oatp14和oat3在内层BRB中表达，并且至少oatp2参与了BRB介导的E17βG和DHEAS外排转运。

项目成果

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专利数量（0）

L-Type amino acid transporter 1 (LAT1)-mediated L-leucine transport at the inner blood-retinal barrier

L 型氨基酸转运蛋白 1 (LAT1) 介导的 L-亮氨酸在血-视网膜内屏障的转运

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
Invest.Ophthalmol.Vis.Sci. 46
影响因子：
0
作者：
Naoki Inoue;Kaoru Kobayashi;et. al.;K.T.Suzuki;H.Naranmandura;K.T.Suzuki;K.T.Suzuki;K.T.Suzuki;K.T.Suzuki;A.Franke;K.T.Suzuki;Yoshiyuki Hattori et al.;Yoshiyuki Hattori et al.;Shigeru Kawakami et al.;Takeshi Terada et al.;Wassana Yeeprae et al.;Yasunori Saito et al.;Yoshiyuki Hattori et al.;Shigeru Kawakami et al.;Shintaro Fumoto et al.;Shigeru Kawakami et al.;Taku Kaitsuka;Taku Kaitsuka;Fumio Soeda;Motoaki Kawano;Fumio Soeda;Motoaki Kawano;Motoaki Kawano;K.Nagase;M.Tomi
通讯作者：
M.Tomi

Evidence for creatine biosynthesis in Muller glial cells

Muller 胶质细胞中肌酸生物合成的证据

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
Glia 52
影响因子：
0
作者：
Naoki Inoue;Kaoru Kobayashi;et. al.;K.T.Suzuki;H.Naranmandura;K.T.Suzuki;K.T.Suzuki;K.T.Suzuki;K.T.Suzuki;A.Franke;K.T.Suzuki;Yoshiyuki Hattori et al.;Yoshiyuki Hattori et al.;Shigeru Kawakami et al.;Takeshi Terada et al.;Wassana Yeeprae et al.;Yasunori Saito et al.;Yoshiyuki Hattori et al.;Shigeru Kawakami et al.;Shintaro Fumoto et al.;Shigeru Kawakami et al.;Taku Kaitsuka;Taku Kaitsuka;Fumio Soeda;Motoaki Kawano;Fumio Soeda;Motoaki Kawano;Motoaki Kawano;K.Nagase;M.Tomi;T.Nakashima
通讯作者：
T.Nakashima

Functional and molecular characterization of adenosine transport at the rat inner blood-retinal barrier