妊娠期における葉酸の体内動態とトランスポーターの機能評価

妊娠期叶酸药代动力学和转运蛋白功能评价

• 批准号: 17790108
• 负责人: 平野 剛
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17790108/
• 关键词: 葉酸; 妊娠; トランスポーター; 胎盤; ホルモン; FRα; 輸送; 防御機構; BCRP; 葉酸; 妊娠; トランスポーター; 胎盤; ホルモン; FRα; 輸送; 防御機構; BCRP

1.葉酸欠乏時のヒト胎盤由来BeWo細胞における葉酸輸送機構の評価BeWo細胞における葉酸の取り込みは、pHの低下によって増大する傾向を示した。一方、葉酸欠乏条件下、pH7.5における葉酸の取り込みは顕著に増大した。さらに、メトトレキサートおよびプテロイン酸、すなわち葉酸構造類似物を用いて阻害実験を行い基質特異性について評価した結果、葉酸欠乏条件下において、その取り込みは有意に阻害された。また、葉酸欠乏によってBCRPの量的および機能的変化は認められなかった。以上の結果より、葉酸欠乏によって変化する輸送担体はpH7.4において高い輸送活性および親和性を有しており、pH5.5において活性が増大する輸送担体とは異なるものであることが示唆された。葉酸欠乏時に葉酸取り込みを増大させた輸送担体を同定することを目的とし、FRαおよびRFCのmRNA発現量を比較した結果、葉酸欠乏時にはそれら両者ともに減少していることが認められた。2.ヒト胎盤における葉酸輸送機構胎盤形成初期の胎盤絨毛に存在するサイトトロホブラスト細胞のモデルとしてBeWo細胞を用いた。RFCの基質であるthiamine pyrophosphate (TPP)は、pH5.5およびpH7.5条件下において阻害効果を示さなかった。したがって、葉酸の取り込みにおいてはRFCの関与は小さく、酸性条件下における葉酸取り込みの増大はFRαを介した輸送であることが示唆された。ヒト満期胎盤BBMVの葉酸取り込みは、BeWo細胞と同様にpH依存性を示し酸性条件下で増大した。FRαを膜から乖離させるPI-PLC処理により、酸性条件下の葉酸取り込みは顕著に減少した。さらに、TPPはPI-PLC処理後の葉酸取り込みを有意に阻害したことから、妊娠後期における葉酸取り込みはFRαおよびRFCの両者が関与していることが示唆された。

1。在叶酸细胞中叶酸缺乏量叶酸摄取期间，对人胎盘衍生的Bewo细胞中叶酸转运机制的评估显示出随着pH的降低而增加的趋势。另一方面，在叶酸缺乏的条件下，pH 7.5时叶酸的摄取显着增加。此外，使用甲氨蝶呤和翼酸，IE，叶酸结构类似物进行抑制实验，并评估底物特异性，并在叶酸缺乏条件下显着抑制摄取。此外，由于叶酸缺乏，未观察到BCRP的定量或功能变化。上述结果表明，由于叶酸缺乏而变化的转运载体在pH 7.4时具有较高的运输活性和亲和力，并且与在pH值为5.5时增加活性的运输载体不同。目的是确定在叶酸缺乏期间增加叶酸摄取的运输载体，以及比较FRα和RFC的mRNA表达水平时，发现两者在叶酸缺乏症中都降低了。 2。人胎盘中的叶酸转运机理用作胎盘形成早期胎盘中存在的细胞增生细胞细胞的模型。硫胺素焦磷酸（TPP）是RFC的底物，在pH 5.5和pH 7.5条件下没有抑制作用。因此，RFC参与叶酸的摄取很小，这表明在酸性条件下叶酸的摄取增加是FRα介导的转运。人胎盘BBMV中的叶酸摄取是pH值依赖性的，并且在酸性条件下增加，类似于Bewo细胞。在酸性条件下，将FRα与膜分离的PI-PLC处理可显着降低叶酸的摄取。此外，TPP在PI-PLC治疗后显着抑制叶酸的摄取，这表明FRα和RFC在妊娠晚期参与叶酸的摄取。