分子標的腫瘍マーカーとしての糖鎖タンパク質の網羅的同定

全面鉴定聚糖蛋白作为分子靶标肿瘤标志物

基本信息

批准号：
05J12043
负责人：
植田幸嗣
金额：
$ 1.73万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05J12043/
关键词：
腫瘍マーカー肺癌糖鎖

项目摘要

本研究は糖鎖構造変化に着目した新規血中腫瘍マーカータンパク質の発見を目的として、平成17年度より当奨励費の助成を得て開始されたものである。本年度は、独自に開発したレクチン結合プロテインチップシステムとSELDI-TOF MS(Surfce enhanced laser desorption/ionization-time of fight mass spectrometry,BioRad社)を用いて、肺癌愚者血清中に存在する糖タンパク質の異常糖鎖を網羅的、ハイスループットに同定する手法を構築した。カルボニルジイミダゾール基でコーティングされたプロテインチップ上に種々のレクチン分子を固相化し、このレクチン結合プロテインチップに糖鎖構造特異的に補足された血清糖タンパク質をSELDI-TOF質量分析計にて測定を行った。Multiple Affity Removal System(Agilent社)により多量タンパク質14種を除去した健常者血清10例、肺腺癌患者血清10例を用いたスクリーニングにより、肺癌患者血清中において高頻度にNeu5Ac(α2,6)GalNAc構造が欠失していると推定されるタンパク質、apolipoprotein C-IIIが同定された。さらに90例の血清サンプルを用いた検証実験により、この糖鎖構造変化の頻度が肺癌の病期依存的に亢進することが明らかとなった。以上より、Apolipoprotein C-III上の特定のシアル酸欠失が新たな肺癌診断マーカーとなる可能性が示唆されたので、簡便に糖鎖構造変化を検出できる診断キットの開発や、より大規模な検証実験を行うことによって、腫瘍マーカーとしての特異性、実用性を検討していく。

这项研究于 2005 年在这笔资助的支持下开始，旨在发现新的血液肿瘤标志蛋白，重点关注糖链结构的变化。今年，我们将使用专有的凝集素结合蛋白芯片系统和 SELDI-TOF MS（表面增强激光解吸/电离时间质谱，BioRad）来研究肺癌患者血清中存在的异常糖蛋白。开发了一种全面的、高通量的方法来识别链。将各种凝集素分子固定在涂有羰基二咪唑基团的蛋白质芯片上，并使用SELDI-TOF质谱仪测量特异性捕获在凝集素结合蛋白质芯片上的血清糖蛋白。使用多重亲和力去除系统（安捷伦）去除 14 种丰富蛋白后，对 10 名健康受试者的血清和 10 名肺腺癌患者的血清进行筛选，发现在肺癌患者的血清中频繁检测到 Neu5Ac(α2,6)GalNAc。鉴定出一种具有假定结构缺失的蛋白质，即载脂蛋白 C-III。此外，使用90例血清样本进行的验证实验表明，这种糖链结构变化的频率随着肺癌的阶段而增加。上述结果表明载脂蛋白C-III上的特异性唾液酸缺失可能作为一种新的肺癌诊断标志物，我们希望开发出一种能够轻松检测糖链结构变化的诊断试剂盒并进行更大规模的研究。通过验证实验，我们将检验其作为肿瘤标志物的特异性和实用性。

项目成果

期刊论文数量（5）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Novel glycoproteomic approach for serum tumor marker screening using SELDI-TOF MS system.

使用 SELDI-TOF MS 系统进行血清肿瘤标志物筛查的新糖蛋白组学方法。

DOI：
发表时间：
2007
期刊：
影响因子：
0
作者：
Koji Ueda;Yataro Daigo;Toyomasa Katagiri;Nobuhisa Ishikawa;Shinji Irie;Taka-aki Sato;Yu Fukase;Nobuoki Kohno;Meiko Shiwa;Yusuke Nakamura.
通讯作者：
Yusuke Nakamura.

ProteinChipシステムを用いた肺癌糖鎖標的マーカーの同定

使用 ProteinChip 系统鉴定肺癌聚糖靶标记