性分化を制御する遺伝子ネットワークの解明

阐明控制性别分化的基因网络

基本信息

批准号：
16109002
负责人：
諸橋憲一郎
金额：
$ 40.93万
依托单位：
National Institute for Basic Biology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (S)
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2008
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16109002/
关键词：
生殖腺性分化転写制御 Ad4BP SF-1 M33 ポリコーム SUMO

项目摘要

我々は遺伝子の機能解析を通じて生殖腺の性分化機構を研究し,これまでに性分化を制御する多数の遺伝子(素因子)の機能解析を行った。同時に,これらの素因子による遺伝子カスケードの解明を発展的研究対象と位置づけ,生殖腺の性分化に異常をきたす各種遺伝子破壊マウスやトランスジェニックマウスの作製を行ってきた。本研究はこれらのマウスを用いた遺伝学的解析によって,素因子間の関係を遺伝学的に体系化すること,そしてその実体を生化学的に同定することで,性分化を制御する遺伝的基盤の理解をめざし、(1)遺伝子改変動物を用いた遺伝学的解析と(2)転写因子を取り巻く複合体の精製とその解析を行った。(1)遺伝子改変動物を用いた遺伝学的解析-本年度はAd4BP/SF-1遺伝子とM33遺伝子の間の関連を解析した。二つの遺伝子はともに生殖腺の発生に不可欠であること、また遺伝学的にはM33がAd4BP/SF-1遺伝子の発現制御を行っていることが明らかになった。そこで、M33抗体を作製し、Ad4BP/SF-1遺伝子座全体を対象としたクロマチン抗体沈降法による解析を行ったところ、Ad4BP/SF-1遺伝子の5'側と3'側にM33の結合が認められた。特に5'側領域は遺伝子の境界を作っていることを示唆する結果を得ていた領域と一致し、この領域の形成にM33を含むポリコーム複合体の関与が示された。(2)転写因子を取り巻く複合体の精製とその解析-生殖腺の分化に不可欠なAd4BP/SF-1やSox9は翻訳後にSUMO化による修飾を受け、その転写活性が制御されることを明らかにしてきた。このSUMO化修飾されたAd4BP/SF-1を認識する因子を精製したところ、クロマチンリモデリング因子様の構造をもつ因子が単離された。この因子の機能解析を通じ、SUMO化による転写活性の制御機構の解析を行っている。

我们通过基因的功能分析研究了性腺中性别分化的机制，到目前为止，我们分析了控制性别分化的许多基因（预成型）的功能分析。同时，我们使用这些倾向因子将基因级联反应阐明，并作为高级研究对象，并产生了各种基因脱离的小鼠和转基因小鼠，导致性腺性别分化异常。这项研究旨在了解使用这些小鼠通过遗传分析来调节性分化的遗传基础，并通过生化鉴定这些物质的实体，（1）使用遗传修饰物质的遗传分析，以及（2）纯化和分析转录因子周围的复合物。（1）分析了使用遗传改性产物的遗传分析 - 今年，分析了AD4BP/SF -1基因与M33基因之间的关系。这两个基因对于性腺发育都是必不可少的，并且已经揭示了M33调节AD4BP/SF-1基因的表达。因此，为整个AD4BP/SF-1基因座制备了M33抗体并通过染色质抗体沉淀法分析，并在AD4BP/SF-1基因的5'和3'侧观察到M33结合。特别是，5'区域与获得结果的区域一致，表明它是有界基因的，表明包含M33在该区域形成中的Polycomb复合物的参与。（2）对转录因子周围复合物的纯化和分析 - 据表明，对于性腺分化而言，AD4BP/SF-1和SOX9受到通过Sumoylation进行翻译后修饰，并调节其转录活性。识别该sumoy的修饰的AD4BP/SF-1的因子被纯化为具有染色质重塑因子样结构的分离因子。通过对该因素的功能分析，分析了通过Sumoylation控制转录活性的机制。

项目成果

期刊论文数量（6）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

SUMO-1 modification of the synergy control motif of Ad4BP/SF-1 regulates synergistic transcription between Ad4BP/SF-1 and Sox9.

Ad4BP/SF-1 协同控制基序的 SUMO-1 修饰调节 Ad4BP/SF-1 和 Sox9 之间的协同转录。

DOI：
发表时间：
2004
期刊：
Mol.End. 18
影响因子：
0
作者：
Komatsu;T.
通讯作者：
T.

Identification of the boundary for histone acetylation between nuclear receptor genes, Ad4BP/SF-1 and GCNF, aligned in tandem.

核受体基因 Ad4BP/SF-1 和 GCNF 之间串联排列的组蛋白乙酰化边界的鉴定。

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
Biochem.Biophys.Res.Commun. 329
影响因子：
0
作者：
Satoru Ishihara;Ken-ichirou Morohashi et al.
通讯作者：
Ken-ichirou Morohashi et al.

Aromatase-knockout mouse carrying an estrogen-inducible enhanced green fluorescent protein gene an facilitates detection of estrogen actions in vivo.

芳香酶敲除小鼠携带雌激素诱导的增强型绿色荧光蛋白基因，有助于检测体内雌激素的作用。

DOI：
发表时间：
2004
期刊：
Endocrinol. 145
影响因子：
0
作者：
竹下純子;大中忠勝;栃原裕;Katsumi Toda et al.
通讯作者：
Katsumi Toda et al.

Mesonephric Fgf9 as the signal that stimulates gonad formation.

中肾 Fgf9 作为刺激性腺形成的信号。

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
Dev.Biol. 280
影响因子：
0
作者：
Hidefumi Yoshioka et al.
通讯作者：
Hidefumi Yoshioka et al.

Nuclear structure-associated TIF2 interacts with glucocorticoid receptor and its target DNA.

核结构相关的 TIF2 与糖皮质激素受体及其靶 DNA 相互作用。

DOI：
发表时间：
2004
期刊：
Biochem.Biophys.Res Commun. 320
影响因子：
0
作者：
A. Watanabe(筆頭著者);K. Okanoya(3番目);S. Sakaguchi(最終著者);et al(著者4名);Hidesato Ogawa et al.
通讯作者：
Hidesato Ogawa et al.