生理的状況下で歯髄に破骨細胞が出現しない原因の実験的解明

实验阐明生理条件下牙髓中不出现破骨细胞的原因

基本信息

批准号：
15791037
负责人：
習田洋子
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Tokyo Medical and Dental University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

先年度は、免疫組織化学的手法を用いて、マウス単球/マクロファージ系細胞を広く認識する抗体であるMOMA-2に対する陽性細胞が、正常マウス切歯歯髄に多数存在することを明らかにした。本年度もまた、マウス単球/マクロファージ系細胞を認識する抗体としてよく知られているF4/80抗体を用いて免疫組織化学的染色をしたところ、正常マウス切歯歯髄において陽性反応を示す細胞が数多く存在することが明らかとなった。骨髄および脾臓から分離したこの抗体に対する免疫陽性細胞は、破骨細胞への分化能を示すという報告がすでにされていることから、正常のマウス切歯歯髄中におけるF4/80陽性細胞は、破骨細胞への分化する可能性のある前駆細胞になりうることを示唆している。さらに正常マウスの切歯より歯髄を抜き取り、細切後培養皿上で静止させると、組織塊より紡錘状の細胞がoutgrowthしてくる。そこにマウスの腹腔マクロファージを破骨細胞に分化させるときと同じスケジュールでM-CSFやRANKLといったサイトカインを添加すると、歯髄培養組織中に破骨細胞への分化マーカーであるTRAP染色において陽性反応を示す細胞が観察された。これらのTRAP陽性細胞は、歯髄組織中に存在する、先ほど示した抗体で免疫陽性であった単球/マクロファージ系細胞が前駆細胞となり、分化したものと推測される。よって本年度の実験において、正常マウス切歯歯髄中に見られる多数の単球/マクロファージ系細胞は、M-CSFやRANKLといった通常前駆細胞から破骨細胞へと分化させることのできるサイトカインに応答して、破骨細胞へと分化する可能性があることが示された。従って生理的状況下のマウスの歯髄において、多数の単球/マクロファージ系細胞が存在するにも関わらず破骨細胞が出現しないということは、この微細環境における破骨細胞分化促進が弱いか、あるいは抑制的な制御機構が備わっているためであろうと推測される。

去年，使用免疫组织化学技术来揭示MOMA-2有许多阳性细胞，MOMA-2是一种正常小鼠门牙中广泛识别小鼠单核细胞/巨噬细胞的抗体。同样，使用F4/80抗体进行免疫组织化学染色，该抗体被称为识别小鼠单核细胞/巨噬细胞的抗体，并且发现许多细胞在正常小鼠门牙中测试阳性。已经报道说，从骨髓和脾脏分离的该抗体的免疫阳性细胞具有分化成骨细胞的能力，这表明正常小鼠门牙中的F4/80阳性细胞可以是可以区分成骨细胞的祖细胞。此外，当从正常小鼠的门牙中提取果肉，切成培养皿，然后停在培养皿上时，主轴形细胞就会从组织质量中生长出来。当细胞因子（例如M-CSF和RANKL）按照与将腹膜巨噬细胞区分为骨细胞相同的时间表时，在茎培养的组织中观察到了对陷阱染色呈阳性的细胞，该细胞被观察到陷阱染色阳性的细胞。假定这些陷阱阳性细胞是由存在于果肉组织中的单核细胞/巨噬细胞分化的，这些细胞与前面提到的抗体免疫阳性。因此，在今年的实验中，显示出许多在正常小鼠门牙中发现的单核细胞/巨噬细胞可以响应细胞因子而分化成破骨细胞，这些细胞因子可以从正常的祖细胞中区分从正常的祖细胞到骨细胞，例如M-CSF和RankL。因此，假定在生理状况下在许多单核细胞/巨噬细胞存在下，在许多单核细胞/巨噬细胞存在下不存在破骨细胞，这是由于在这种微环境中促进破骨细胞分化或提供抑制性调节机制的能力所致。