難治性小児滲出性中耳炎に対する薬物療法の確立

难治性儿童渗出性中耳炎药物治疗的建立

基本信息

批准号：
15790934
负责人：
小笠原圭子
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Shimane University (2004)Shimane Medical University (2003)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

1)滲出性中耳炎の病態ならびにその遷延化の研究のため、滲出性中耳炎患児より中耳貯留液を採取し、種々のサイトカインやケモカインの測定を行い、TGF-β、IFN-γ、IL-5、IL-8などを検出した。その測定量は、アレルギー性鼻炎を伴う症例や、感染性炎症を伴う症例、さらには遷延化している症例において、それぞれ異なる傾向を示した。2)滲出性中耳炎の病態の解明、薬物療法の権立を目的として、各種薬剤(抗ヒスタミン薬、マクロライド系抗生物質など)の薬理学的効果を検討した。鼻咽腔や耳管・中耳粘膜上皮のToll-like receptor(TLR)の発現について、RT-PCRやNorthern blottingにより検討し、TLR-2,TLR-4などの発現を証明した。さらに、in vitroで、これらの上皮細胞を培養し、TLRのリガンドであるlipoproteinやlipopolysaccharide(LPS)で刺激した際の、サイトカインならびにケモカインの産生を検討し、各種薬剤の影響につき、細胞内シグナル伝達機構の観点から、実験を行った。その結果、第2世代の抗ヒスタミン薬が臨床用量において容量依存的に、上皮細胞からのIL-8の産生を抑制し、そのメカニズムはNF-κBの抑制によるものであることを証明した。3)滲出性中耳炎の病態形成や遷延化の原因である耳管や中耳腔の細菌感染に対する免疫防御機構の賦活を日的として、有望なワクチン療法(経口・経鼻投与)を開発するため、卵白アルブミンに特異的なT細胞受容体(TCR)を遺伝子導入したマウス(OVA-Tgマウス)を用いて、経鼻感作による耳管・中耳粘膜の抗原特異的な粘膜免疫応答(分泌型IgA)の賦活を試みた。その結果、粘膜アジュバンドなしでも、抗原の点鼻投与により、耳管・中耳腔洗浄液に抗原特異的なIgA反応(特異的IgA抗体産生の誘導、抗原特異的抗体産生B細胞の有意な検出)が誘導されることが判明した。これらの結果は、中耳炎予防におけるワクチン療法の確立において重要な基礎的な研究成果であり、局所における抗原特異的T細胞の分化・増殖が鍵であることを示唆しており、鼻咽腔からの抗原投与が有望なワクチン療法になりうることが証明された。

1）研究渗出性中炎培养基的病理及其延长程度，从患有渗出性中炎培养基的儿童中收集了中耳储存液，测量了各种细胞因子和趋化因子和趋化因子以检测TGF-β，IFN-γ，IL-5，IL-5，IL-8等。长期。 2）我们研究了各种药物（抗组胺药，大环内酯类抗生素等）的药理作用，目的是阐明渗出性冲刺培养基的病理并确定药物治疗权。通过RT-PCR和Northern印迹研究了Toll样受体（TLR）在鼻咽度，尤斯塔克式管和中耳粘膜上皮的表达，以及TLR-2，TLR-4等的表达。此外，当这些上皮细胞在体外培养并用TLR配体脂蛋白和脂多糖（LPS）刺激时，我们研究了细胞因子和趋化因子的产生，并实验是对各种药物的效果进行的，从内体信号转移机构的角度来看。结果，我们证明了第二代抗组胺药以临床剂量的体积依赖性方式抑制上皮细胞的IL-8产生，并且该机制是由于NF-κB的抑制作用。 3) In order to develop promising vaccine therapy (oral and nasal administration), with the activation of immune defense mechanisms against bacterial infections in the Eustachian tube and middle ear cavity, which are the cause of the pathology and prolongation of exudative otitis media, we attempted to activate antigen-specific mucosal immune responses (secreted IgA) in the Eustachian tube and middle ear mucosa by使用针对卵蛋白特异的T细胞受体（TCR）转染的小鼠鼻敏化。结果，发现抗原诱导的抗原特异性IgA反应（诱导特异性IgA抗体的产生，在尤斯塔西亚管中抗原特异性抗体产生的B细胞的显着检测）和中耳灌洗液中的抗原特异性抗体产生的B细胞，即使没有粘膜佐剂，也是中耳流体的。这些结果是在预防中炎培养基中建立疫苗治疗的重要基础研究结果，这表明局部抗原特异性T细胞分化和增殖是关键，并且证明，通过鼻咽剂可以是一种有希望的疫苗治疗。