EBウイルスRK-BARF0による上皮細胞癌化及び腫瘍形成におよぼす影響の解析

EB病毒RK-BARF0对上皮细胞癌变及肿瘤形成的影响分析

基本信息

批准号：
15790243
负责人：
草野秀一
金额：
$ 2.18万
依托单位：
St. Marianna University School of Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15790243/
关键词：
ウイルス発現制御感染症タンパク質遺伝子

项目摘要

本研究は、Epstein-Barrウイルス(EBV)陽性上咽頭がんで多量に発現されているmRNAにコードされているタンパク質であるRK-BARFOが、Wntシグナルの抑制因子として知られる、その宿主標的タンパク質であるI-mfaの機能に及ぼす影響を解析し、EBVによる上皮細胞癌化機構を解明することを目的に行った。昨年度は以下の3点を明らかにした。(1)RK-BARFOはWntシグナルの抑制因子として知られる宿主タンパク質であるI-mfaと細胞内で相互作用する。(2)この相互作用はRK-BARFOの核移行を阻害し、RK-BARFOの細胞質における蓄積を促進する。(3)RK-BARFOはI-mfa依存的なWntシグナルの抑制を解除する。それに加えて、本年度は、このRK-BARFOの作用は、I-mfaとTCF/LEFとの結合にRK-BARFOが直接的に競合することにより、I-mfaとTCF/LEFの結合が阻害された結果として起こることが、in vitro及びin vivoにおける免疫沈降実験により明らかとなった。また、EBウイルスの潜伏感染膜タンパク質であるLMP2Aは、Wntシグナル伝達経路の上流に位置するリン酸化酵素であるAktを活性化することでWntシグナルの促進を行うことが知られている。そこで、Wntシグナルの促進に対して、RK-BARFOとLMP2Aが、協同的に作用するのかどうかをレポーターアッセイにより検討した。その結果、RK-BARFOとLMP2Aは相乗的にWntシグナルを促進することが明らかになった。以上の結果から、RK-BARFOは、I-mfaのWntシグナル抑制機能を阻害するタンパク質であること、及び、EBVは、Aktの促進及びI-mfaの阻害という2つの作用でWntシグナルの促進を行い、上皮細胞の癌化を促進させている事が強く示唆された。

这项研究分析了由mRNA编码的蛋白质RK-barfo的作用，该蛋白在爱泼斯坦 - 巴尔病毒（EBV） - 阳性鼻咽癌中对其宿主靶蛋白I-MFA的功能，被称为WNT信号的抑制作用，并通过EB澄清EBV引起的机械性。去年，揭示了以下三个点：（1）RK-BARFO与I-MFA的细胞内相互作用，I-MFA是一种被称为WNT信号抑制器的宿主蛋白。（2）这种相互作用抑制了RK-Barfo的核易位，并促进了RK-Barfo在细胞质中的积累。（3）RK-BARFO释放I-MFA依赖于Wnt信号的抑制。此外，体外和体内免疫沉淀实验今年表明，由于RK-BARFO抑制I-MFA和TCF/LEF的结合，RK-BARFO的影响是由于RK-BARFO直接竞争I-MFA和TCF/LEF的结合而引起的。此外，已知LMP2A是EB病毒的潜在传染性膜蛋白，可以通过激活Akt（一种位于Wnt信号通路上游的磷酸烯酶）来促进Wnt信号。因此，我们研究了RK-Barfo和LMP2A是否合作以促进记者测定法的WNT信号传导。结果表明，RK-BARFO和LMP2A协同促进WNT信号传导。以上结果强烈表明RK-BARFO是一种抑制I-MFA的Wnt信号抑制功能的蛋白质，EBV通过两种动作促进Wnt信号传导：促进AKT和I-MFA抑制，促进上皮细胞的癌症。