脂質代謝系転写因子の複合調節による体エネルギー分配の改変

通过脂质代谢转录因子的复杂调节改变身体能量分布

基本信息

批准号：
15780179
负责人：
村井篤嗣
金额：
$ 2.37万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

脂質代謝系はエネルギーの蓄積と分解に携わっており、蓄積と分解に働く酵素の発現を正あるいは負に調節することができれば、代謝バランスを効率良く変動させることができる。鳥類肝臓では、哺乳類には存在しない二種類の脂肪酸結合蛋白質(L型およびLb型)が存在しており、脂質系転写因子の発現を間接的に制御する。そこで、二種類の脂肪酸結合蛋白質を強制発現させた細胞培養系を用い、脂質蓄積量に如何なる変化をもたらすのかについて調査した。また、脂肪酸結合蛋白質の発現を制御する転写因子を検索し、脂肪酸結合蛋白質の発現を正あるいは負に調節することが可能かについても検討した。得られた結果の概要は以下の通りである。1)L型およびLb型脂肪酸結合蛋白質を強制発現させたBHK細胞株を作製し、細胞内の脂質含有量を調査した。2)L型脂肪酸結合蛋白質を強制発現させた細胞株で中性脂肪含量が増加したが、リン脂質およびコレステロール含量に変化は見られなかった。3)Lb型脂肪酸結合蛋白質を強制発現させた細胞株では何れの脂質成分含量にも変化は見られなかった。したがって、両脂肪酸結合蛋白質のうちL型のみがエネルギー蓄積を正に制御していることが判明した。4)両脂肪酸結合蛋白質のプロモーター領域を含むレポーター遺伝子を培養細胞へ導入し、それらの転写を制御する要因について調査した。5)核内転写因子であるニワトリPPAR-αを強制発現させるとともに、脂溶性リガンドであるETYAを添加した所、L型では発現が強く誘導されたが、Lb型では変化が見られなかった。6)ニホンウズラ肝臓におけるPPAR-αと両FABPの発現量の相関関係を調査した所、L型では強い正の相関が観察されたのに対し、Lb型での相関は弱いものであった。7)以上より、鳥類におけるL型脂肪酸結合蛋白質の発現量はPPAR-αにより調節を受けるとともに、このL型脂肪酸結合蛋白質の発現量を変化させることにより脂質蓄積量を調節することが可能であるこを示した。

脂质代谢系统参与能量的积累和降解，并且如果在积累和降解中作用的酶的表达可以积极或负调节，则可以有效地改变代谢平衡。在禽肝中，哺乳动物中不存在的两种类型的脂肪酸结合蛋白（L型和LB型）间接调节脂质转录因子的表达。因此，我们使用细胞培养系统研究了脂质积累的变化，其中两种类型的脂肪酸结合蛋白被迫表达。此外，搜索控制脂肪酸结合蛋白表达的转录因子，以及脂肪酸结合蛋白的表达是否可以受到积极或负调节。获得的结果的摘要如下。 1）制备BHK细胞系，其中L型和LB型脂肪酸结合蛋白被迫表达，并研究了细胞中的脂质含量。 2）在强制表达L型脂肪酸结合蛋白的细胞系中，甘油三酸酯的含量增加，但在磷脂和胆固醇含量中未发现变化。 3）在细胞系中，在任何脂质含量中均未观察到可强行表达的LB型脂肪酸结合蛋白的变化。因此，发现两种脂肪酸结合蛋白的L型阳性调节能量积累。 4）将包含两种脂肪酸结合蛋白的启动子区域的报告基因引入培养细胞中，并研究了调节其转录的因子。 5）当核转录因子强迫鸡PPAR-α表达表达并添加脂质溶剂ETYA时，在L型中强烈诱导表达，但在LB型中未观察到变化。 6）当我们研究了日本鹌鹑肝脏中PPAR-α的表达水平与两个FABP之间的相关性时，在L型中观察到很强的阳性相关性，而LB型的相关性较弱。 7）以上表明，鸟类中L型脂肪酸结合蛋白的表达水平受PPAR-α的调节，并且可以通过改变L型脂肪酸结合蛋白的表达水平来调节脂质积累。