マウス肝細胞におけるToll様受容体の発現および機能調節に関する研究

小鼠肝细胞Toll样受体的表达及功能调控研究

• 批准号: 03J61536
• 负责人: 松村 隆之
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03J61536/
• 关键词: TRAF6; TIFA; TIFAB; IL-1; TGFβ; TLR; Toll様受容体; サイトカイン; 急性期タンパク質; 肝細胞

我々は以前、炎症性サイトカインInterleukin-1(IL-1)αがマウス肝細胞における機能的なToll-like receptor(TLR)2の発現を増強させること、細菌由来のリポペプチド(BLP)が、TLR2を介して肝細胞からの血清アミロイドA(SAA)の産生を誘導することを報告している。本研究では、抗炎症性サイトカインTGF-βの肝細胞におけるTLR2発現におよぼす影響を調べた。TGF-βは、mRNA,タンパクレベルともにマウス肝細胞におけるTLR2の発現を増強した。BLPで誘導されるSAAのプロモーター活性はIL-1αの前処理で増強された。しかし、TGF-βやTGF-βとIL-1αで前処理すると増強されなかった。IL-1αによるTLR2のプロモーターの活性化や、NF-κBの活性化はTGF-β前処理により強く抑制され、その抑制とI型IL-1レセプター(IL-1RI)のmRNA発現レベルは一致した。IL-1αはIL-1RIのmRNA発現を増強したが、TGF-βで処理することにより抑制された。この結果は、TGF-βはIL-1RIの発現を抑制することにより、IL-1αによるTLR2の発現誘導を抑制することを示唆している。これらの結果はまた、肝細胞におけるTLR2を介するSAAの発現におけるIL-1αとTGF-βの違いを示している。Tumor necrosis factor receptor (TNFR)-associated factor (TRAF)ファミリータンパク質は、TNFRスーパーファミリーやToll/IL-1Rファミリーに属するレセプターからのシグナル伝達において重要な役割を担っている。当研究室では、TRAF6がIL-1R、CD40、RANKなどの炎症免疫反応で中心的な役割を果たすレセプターのシグナル伝達に必須であること、さらに骨形成、皮膚付属器官形成、リンパ節形成や神経管形成などヒトにおける種々の疾患に深く関連する器官の形成にも必須であることを明らかにしている。我々は、TRAF結合タンパク質TIFA(TRAF-interacting protein with a forkhead-associated domain)と、その類似タンパク質TIFABを同定し、これらの分子がTRAF6と三者複合体を形成すること、TIFABはTIFAを介した転写因子NFκBの活性化を阻害することを見出した。このことは、TIFAおよびTIFABが、TRAF6の関わるシグナル伝達において重要な調節因子であることを意味している。さらに今回TRAF6欠損マウスを用いた解析により、TRAF6はMyD88依存的なTLRシグナルにも必須であることを示した。

我们之前证明炎症细胞因子白介素-1 (IL-1)α 增强小鼠肝细胞中功能性 Toll 样受体 (TLR)2 的表达，而细菌脂肽 (BLP) 增强功能性 Toll 样受体 (TLR) 的表达。据报道，小鼠肝细胞中的 TLR)2 可通过诱导肝细胞产生血清淀粉样蛋白 A (SAA)。在这项研究中，我们研究了抗炎细胞因子TGF-β对肝细胞中TLR2表达的影响。 TGF-β 在 mRNA 和蛋白质水平上增强小鼠肝细胞中 TLR2 的表达。 IL-1α 预处理增强了 BLP 诱导的 SAA 启动子活性。然而，用TGF-β或TGF-β和IL-1α预处理并没有增强效果。 TGF-β预处理强烈抑制IL-1α引起的TLR2启动子激活和NF-κB激活，并且这种抑制与I型IL-1受体(IL-1RI)的mRNA表达水平一致。 IL-1α 增强 IL-1RI mRNA 表达，而 TGF-β 处理可抑制 IL-1RI mRNA 表达。该结果表明，TGF-β通过抑制IL-1RI的表达来抑制IL-1α对TLR2表达的诱导。这些结果还证明了肝细胞中 TLR2 介导的 SAA 表达中 IL-1α 和 TGF-β 之间的差异。肿瘤坏死因子受体 (TNFR) 相关因子 (TRAF) 家族蛋白在 TNFR 超家族和 Toll/IL-1R 家族受体的信号转导中发挥重要作用。我们的实验室已证明TRAF6对于炎症免疫反应中起核心作用的受体（如IL-1R、CD40和RANK）的信号转导至关重要，并且还参与骨形成、皮肤附属器形成、淋巴结形成研究表明，它对于与各种人类疾病密切相关的器官的形成（例如管的形成）至关重要。我们鉴定了TRAF结合蛋白TIFA（具有叉头相关结构域的TRAF相互作用蛋白）及其类似蛋白TIFAB，并发现这些分子与TRAF6形成三联复合物，并且发现TIFAB与TIFA相互作用。抑制转录因子 NFκB 的激活。这意味着TIFA和TIFAB是涉及TRAF6的信号转导的重要调节因子。此外，我们使用 TRAF6 缺陷小鼠的分析表明，TRAF6 对于 MyD88 依赖性 TLR 信号也是必需的。

项目成果

TIFAB inhibits TIFA, TRAF-interacting protein with a forkhead-associated domain

TIFAB 通过叉头相关结构域抑制 TIFA、TRAF 相互作用蛋白

• 发表时间: 2004
• 期刊: Biochem.Biophys.Res.Commun. 317
• 作者: Matsumura;T. et al.
• 通讯作者: T. et al.

Takayuki Matsumura: "TRAF6-NF-κB pathway is essential for interleukin-1-induced TLR2 expression and its functional response to TLR2 ligand in murine hepatocytes"Immunology. 109(1). 127-136 (2003)

Takayuki Matsumura：“TRAF6-NF-κB 途径对于白细胞介素 1 诱导的 TLR2 表达及其对小鼠肝细胞中 TLR2 配体的功能反应至关重要”109(1) (2003)。

TNFR-associated factor (TRAF) 6 is essential for MyD88-dependent pathway but not Toll/IL-1 receptor domain-containing adaptor-inducing IFN-β (TRIF)-dependent pathway in TLR signaling

TNFR 相关因子 (TRAF) 6 对于 MyD88 依赖性途径至关重要，但对于 TLR 信号转导中包含 Toll/IL-1 受体结构域的接头诱导 IFN-β (TRIF) 依赖性途径不是必需的

• 发表时间: 2004
• 期刊: Journal of Immunology 173(5)
• 作者: Wachino J;Kurokawa H;Suzuki S;Yamane K;Shibata N;Kimura K;Ike Y;Arakawa Y;Jin Gohda
• 通讯作者: Jin Gohda

松村 隆之: "肝細胞におけるTLRの発現とその意義"臨床免疫 Clinical Immunology. 40(3). 254-258 (2003)

Takayuki Matsumura：“肝细胞中 TLR 的表达及其意义”临床免疫学 40(3) (2003)。

TGF-β down-regulates IL-1α-induced TLR2 expression in murine hepatocytes

• DOI: 10.1189/jlb.0104108
• 发表时间: 2004-06-01
• 期刊: JOURNAL OF LEUKOCYTE BIOLOGY
• 影响因子: 5.5
• 作者: Matsumura, T;Hayashi, H;Onozaki, K
• 通讯作者: Onozaki, K