小児感染症の分子生物学的研究

儿科传染病的分子生物学研究

基本信息

批准号：
03F00348
负责人：
小林邦彦
金额：
$ 0.77万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

2001年に発見されたhuman metapnumovirus(hMPV)は、RSウイルス同様に様々な呼吸器疾患(細気管支炎、喘息様気管支炎等)の原因ウイルスとして注目されている。我々の研究グループは本ウイルスの分離法、RT-PCR法によるウイルスゲノムの検出法、蛍光抗体法による抗体検査法を確立して、以下の事項を明らかにしてきた。1.呼吸器感染症患者から採取した咽頭鼻汁ぬぐい液268検体中7検体(2.6%)よりウイルスが分離された。2.咽頭鼻汁ぬぐい液637検体中57検体(8.9%)でRT-PCR陽性であった。3.1か月から35歳までの血清142検体について抗hMPV抗体を検索したところ、抗体保有率は72.5%で、加齢と共に抗体陽性率は上昇した。4.RT-PCR法にてhMPVの存在が証明された患者の急性期と回復期のペア血清中の抗hMPV抗体価を測定したところ、10組中8組で4倍以上の抗体価の上昇を認めた。以上、小児の呼吸器感染症を起こす原因ウイルスのなかで、hMPVは重要な位置を占めていることが明らかになった。これらの研究成果を元に本年度中に達成された、あるいは進行中の研究を列記する。1.分離されたウイルス7株のN,P,M,F,M2,SH,Gの塩基配列を決定して分子系統樹を作製した。これら7株とすでに塩基配列が発表されている3株、計10株は2つの大グループ、4つのサブグループのいずれかに属することを明らかにした。ウイルスの表面糖蛋白のひとつG蛋白は各株間で大きく異なっていたが(33%)、4つのサブグループ内ではよく保たれていた(88-96%)。hMPVの中和抗体を考える上で重要である(投稿中)。2.hMPV感染細胞をマウスに免疫してモノクローナル抗体を作製した。少なくとも4株が得られ、現在characterizationを行っている。3.ヒト気管上皮培養細胞にhMPVを吸着させて、その後感染が成立するか否かを確認する。感染が成立した時、各種サイトカインの発現増強の有無などを検索して、hMPV感染症の病態解析を行う。

2001年发现的人元病毒（HMPV）引起了人们对各种呼吸道疾病（例如毛绒火焰，哮喘支气管炎等）的关注，例如RS病毒。我们的研究小组已通过RT-PCR方法建立了这种病毒分离方法，一种使用荧光抗体方法的抗体测试方法，并揭示了以下项目。 1。该病毒已从呼吸道感染患者收集的268个咽鼻擦液中的七个样品中分离出来。 2。咽鼻打折液体637样品（8.9％）637个标本为RT-PCR阳性。当搜索抗-HMPV抗体以从35个月到35岁的血清142个样品中，抗体所有权率为72.5％，随着衰老的衰老增加。 4。测量了RT-PCR方法中HMPV的患者抗HMPV抗体价格，但我承认了10对10对的10套，我承认了4次。有人发现，HMPV在引起儿童呼吸道感染的病毒中占据重要地位。基于这些研究结果或正在进行的研究，该研究已在本财政年度实现。 1。确定了七个分离病毒的n，p，m，f，m2，s，g的基础序列，以创建一个分子系统。这七股和三股股票已经宣布，基本序列已宣布，共有10股属于两个大型集团之一，四个亚组之一。 G蛋白是病毒表面糖蛋白之一，股份之间的差异很大（33％），但在四个亚组（88-96％）内得到很好的维持。这对于考虑HMPV的中性抗体（发布）很重要。 2。将HMPV感染的细胞进入小鼠，以产生单克隆抗体。至少已经获得了四股，目前正在进行表征。 3。人troneal上皮被吸附在HMPV中，然后确认感染是否随后发生。建立感染后，通过寻找或不存在各种细胞因子的表达来进行HMPV感染的病理分析。