雌性行動神経回路を構成し可視化した視床下部ニューロンに対するエストロジェンの作用

雌激素对构成和可视化女性行为神经回路的下丘脑神经元的影响

基本信息

批准号：
14780606
负责人：
濱田知宏
金额：
$ 1.98万
依托单位：
Nippon Medical School
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

エストロジエン受容体(ER)トランスジェニック(TG)ラットを用いた検討これまでの研究により、α型ERを発現するニューロンを生きた状態で可視化されるTGラットの作製に成功した。すなわち、ラットα型ER遺伝子プロモーターのひとつであるプロモーターO/Bの下流に、GFP遺伝子を結合させた導入遺伝子を用いることで、雌型性行動に対し抑制的に働く視索前野にGFPを発現するTGラットを得た。視索前野に存在するGFP発現細胞の70%は免疫組織学的にERを発現し、このGFP発現はERと同様にエストロジェンによってdown-regulateされていることから、プロモーターO/BがERのdown-regulationに関わっていることが明らかとなった(論文投稿中)。複数存在するER遺伝子プロモーターの機能的差異についてはほとんどわかっておらず、本研究の結果によりその一端が明らかとなった。また同時にER遺伝子プロモーターの制御下で発現したGFP蛍光を指標として、これまで困難であったER発現ニューロンを生きた状態で可視化することが可能となった。これら視索前野GFP発現細胞を用いた、エストロジェン作用に関する電気生理学的な研究を現在進めている。一方で雌型性行動に対し促進中枢と考えられ、BRの局在が観察される視床下部腹内側核にはほとんどGFPは発現していなかった。このことは視索前野と腹内側核で機能しているER遺伝子プロモーターが異なることを示唆している。以上のように雌型行動神経回路を可視化する目的で作製したTGラットを用いることで、本来の目的を達しただけでなく、これまで不明であった多種類ER遺伝子プロモーターの存在意義について重要な知見が得られた。特に雌の性行動に対し拮抗的に働いている二つの神経核で、異なるプロモーターが機能しているということは興味深く、今後の研究進展が期待される。

使用雌激素受体（ER）转基因（TG）大鼠的研究通过之前的研究，我们成功地培育出可以在活体状态下观察到表达α型ER的神经元的TG大鼠。换句话说，通过使用其中GFP基因连接在启动子O/B(其是大鼠α型ER基因启动子之一)下游的转基因，GFP在视前区表达，从而抑制雌性TG的性行为。获得大鼠。视前区 70% 的 GFP 表达细胞在免疫组织学上表达 ER，并且这种 GFP 表达受到雌激素和 ER 的下调，因此启动子 O/B 负责 ER 的下调 - 现已明确。他参与监管（目前正在提交论文）。人们对多个 ER 基因启动子之间的功能差异知之甚少，本研究的结果对此提供了一些线索。同时，使用ER基因启动子控制下表达的GFP荧光作为指示剂，可以在活体状态下可视化表达ER的神经元，这在以前是很困难的。我们目前正在使用这些视前区 GFP 表达细胞进行雌激素效应的电生理学研究。另一方面，下丘脑腹内侧核中几乎没有 GFP 表达，该核被认为是女性型性行为的促进中心，并且在其中观察到 BR 定位。这表明在视前区和腹内侧核发挥作用的ER基因启动子是不同的。如上所述，通过使用以可视化雌性行为神经回路为目的而创建的TG大鼠，我们不仅达到了最初的目的，而且还揭示了多种类型ER基因启动子存在的意义的重要信息，这为我们的研究奠定了基础。直到现在还不清楚。特别有趣的是，不同的启动子在两个神经核中发挥作用，对女性性行为产生拮抗作用，未来的研究有望取得进展。