ヘリコバクターピロリのアポトーシス誘導因子の精製

幽门螺杆菌凋亡诱导因子的纯化

• 批准号: 14770224
• 负责人: 柴山 恵吾
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: National Institute of Infectious Diseases
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14770224/
• 关键词: ヘリコバクターピロリ; アポトーシス; ガンマグルタミルトランスペプチダーゼ; γ-glutamyltranspeptidase; 毒素; 病原因子

この研究で、H.pyloriが産生するアポトーシス誘導蛋白を精製し、その蛋白の同定を行うことに成功した。この蛋白は、これまでに知られているH.pyloriの病原因子とは全く違うものであるとともに、H.pyloriによる宿主細胞のアポトーシスの誘導に大きな役割を果たすものであることが分かった。この蛋白は、γ-glutamyl transpeptidase (GGT)であることが分かった。GGTがアポトーシス誘導に関与しているということはこれまでに報告がなく、新しい知見である。GGTは一般的にグルタチオンなどのγ-glutamyl基を含む物質からglutamyl基を遊離し、他のアミノ酸に転移する活性を持つとされるが、H.pyloriのGGTのアポトーシス誘導活性には基質としてグルタミンが関与していることが示唆された。なお、GGT活性はH.pyloriの特徴的な生化学的性状の一つで、この菌の同定の際の指標にもなるとされている。我々も臨床分離株83株について調べたところ、全ての株がこの蛋白を産生していた。このことは、全てのH.pyloriがアポトーシス誘導活性を持つことを示唆する。HP1118遺伝子を欠損させたisogenic mutant株は、親株に比べてアポトーシス誘導活性が有意に低かったため、GGTはH.pyloriのアポトーシス誘導活性の中で重要な役割を果たすものの一つであると考えられた。この研究により得られた結果はこれまでの常識を覆す側面を多く含んでおり、H.pyloriの病原性の研究に新たな突破口を開くとともに、今後の発展が非常に期待できるものである。

在本研究中，我们成功纯化并鉴定了幽门螺杆菌产生的凋亡诱导蛋白。该蛋白与此前已知的幽门螺杆菌毒力因子完全不同，并且还被发现在幽门螺杆菌诱导宿主细胞凋亡中发挥主要作用。发现这种蛋白质是γ-谷氨酰转肽酶（GGT）。此前尚未有GGT参与细胞凋亡诱导的报道，这是一个新的发现。一般认为GGT具有从谷胱甘肽等含有γ-谷氨酰基的物质中释放谷氨酰基并将其转移至其他氨基酸的活性。 GGT 活性是幽门螺杆菌的生化特征之一，据说是识别该细菌的指标。我们还研究了 83 个临床分离株，发现它们都产生这种蛋白质。这表明所有幽门螺杆菌都具有细胞凋亡诱导活性。缺乏HP1118基因的同基因突变株的细胞凋亡诱导活性显着低于亲本菌株，表明GGT在幽门螺杆菌的细胞凋亡诱导活性中发挥着重要作用。这项研究取得的成果多方面颠覆了传统观念，为幽门螺杆菌致病性研究开辟了新突破，未来发展令人期待。

项目成果

柴山恵吾, 蒲地一成, 八木哲也, 土井洋平, 柴田尚宏, 山根一和, 加藤はる, 荒川宜親: "Helicobacter pyloriのアポトーシス誘導蛋白の精製、同定"日本ヘリコバクター学会誌. (発表予定). (2004)

Keigo Shibayama、Kazunari Kamachi、Tetsuya Yagi、Yohei Doi、Naohiro Shibata、Kazukazu Yamane、Haru Kato、Yoshichika Arakawa：“幽门螺杆菌中凋亡诱导蛋白的纯化和鉴定”日本螺杆菌学会杂志（待出版）。 （2004）

柴山恵吾, 荒川宜親: "Helicobacter pyloriによるアポトーシス誘導"日本ヘリコバクター学会誌. (発表予定). (2004)

Keigo Shibayama、Yoshichika Arakawa：“幽门螺杆菌诱导细胞凋亡”，日本螺杆菌学会杂志（待发表）（2004 年）。

Keigo Shibayama, et al.: "A novel apoptosis-inducing protein from Heilcobacterpylori"Molecular Microbiology. 47(2). 443-451 (2003)

Keigo Shibayama 等人：“来自幽门螺杆菌的新型细胞凋亡诱导蛋白”分子微生物学。

Shibayama K., Kamachi K., Nagata N., Yagi T., Nada T., Doi Y., Shibata N., Yokoyama K., Yamane K., Kato H., Iinuma Y., Arakawa Y.: "A Novel Apoptosis Inducing Protein from Helicobacter pylori"Molecular Microbiology. 47(2). 443-451 (2003)

Shibayama K.、Kamachi K.、Nagata N.、Yagi T.、Nada T.、Doi Y.、Shibata N.、Yokoyama K.、Yamane K.、Kato H.、Iinuma Y.、Arakawa Y.：“A