ウェストナイル脳炎媒介蚊の殺虫剤感受性調査と殺虫剤抵抗性の分子診断法確立

西尼罗脑炎病媒蚊药敏性调查及抗药性分子诊断方法的建立

• 批准号: 14770113
• 负责人: 葛西 真治
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: National Institute of Infectious Diseases
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14770113/
• 关键词: ウエストナイル熱; 殺虫剤抵抗性; ピレスロイド剤; ナトリウムチャネル; シトクロムP450; アカイエカ; ヒトスジシマカ; ネッタイイエカ; kdr; チカイエカ

米国におけるウエストナイル熱の流行は2004年度も収まる気配がない。日本も依然として本ウイルス上陸の脅威にさらされている。そんな中で媒介昆虫として重要と思われるアカイエカ種群蚊について、殺虫剤感受性レベルを引き続き調査した。また、昨年度の研究で明らかになりつつある抵抗性機構についてさらに詳細なデータを蓄積した。日本各地で採集したアカイエカとチカイエカのコロニーを使い,5種の殺虫剤に対する幼虫の殺虫剤感受性を調べた。殺虫剤感受性系統アカイエカ洞穴に関するLC_<99> X 100に相当するエトフェンプロックス(5.7ppm),テメフォス(1.1ppm),フェニトロチオン(3.3ppm),ならびに「99%羽化阻害濃度X 100」に相当するジフルベンズロン(0.92ppm),ピリプロキシフェン(0.22ppm)の濃度において生存率5%以上のコロニー数は,アカイエカ(総試験数37)ではそれぞれ19,1,0,3,0,また,チカイエカ(総試験数17)ではそれぞれ7,1,0,2,6であった。昨年度までの研究で、アカイエカ抵抗性要因の一つとして作用点分子であるナトリウムチャネルの構造変異(kdr)が予想された。そこで、感受性低下の度合いが比較的大きかった林試の森系をエトフェンプロックスで7世代室内淘汰し、殺虫剤感受性の変化を観察すると共に左kdrの原因と予想されたSer999頻度の推移を観測した。エトフェンプロックスに対する感受性は淘汰を重ねるごとに低下し、7世代後には1500倍もの抵抗性レベルを示した。一方、Ser999をホモにもつ個体頻度は淘汰開始時に0%であったのが、7世代後には98%を占めた。これにより、Ser999はPhe999同様にエトフェンプロックス感受性に大きく関わっていることが示された。

2004年，美国的西尼罗热疫情没有任何放缓的迹象。日本仍然受到这种病毒到来的威胁。在此背景下，我们继续调查库蚊的杀虫剂敏感性水平，库蚊被认为是重要的传播媒介。此外，我们还积累了有关耐药机制的更详细数据，这些数据在去年的研究中变得越来越清晰。我们利用从日本各地采集的淡色库蚊和淡色库蚊群体，调查了幼虫对五种杀虫剂的敏感性。 LC_<99> 用于对杀虫剂敏感的库蚊菌株在相当于100%的除虫脲(0.92ppm)和吡丙醚(0.22ppm)浓度下，存活率为5%或更高的菌落数分别为19、1、0、3、0和1，淡色库蚊（总共 37 次测试）在 Chikayeka（测试总数：17）中，结果分别为 7、1、0、2 和 6。直到去年进行的研究预测，作为作用点分子的钠通道（kdr）的结构变化是库蚊抵抗力的因素之一。因此，我们在森林试验中敏感性下降幅度较大的林线上使用依托芬醚进行了7代室内选择，观察了杀虫剂敏感性的变化以及Ser999频率的变化，预测是左kdr的原因。随着连续选择，对依托芬菊的敏感性下降，七代后，耐药水平提高了1500倍。另一方面，Ser999纯合个体的频率在选择开始时为0%，但在7代后则占98%。这表明 Ser999 与 Phe999 一样，显着参与了依托芬Prox 敏感性。