中枢神経系におけるカテコールアミンの生合成に及ぼすリポ多糖の影響

脂多糖对中枢神经系统儿茶酚胺生物合成的影响

基本信息

批准号：
14770018
负责人：
金子葉子
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Fujita Health University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2003
项目状态：
已结题

项目摘要

これまでに、マウスの腹腔内に投与したグラム陰性桿菌のリポポリサッカライド(LPS)によって中枢神経系の青斑核においてノルエピネフリン(NE)の代謝回転が亢進するメカニズムを明らかにした。しかしながら、その代謝回転上昇の意義は明らかになっていない。さらに、増加したNEは6時間後に定常状態に戻るが、それ以降の変化についてはまだ解析されていない。そこで、LPS投与8時間以降のNEの変化、炎症性サイトカインの発現量を測定した。炎症性サイトカインに着目したのは、神経系と免疫系のクロストークにおいて、カテコールアミンとサイトカインが重要な役割を果たしていると考えられ、さらに、中枢神経系における炎症性サイトカインの発現が、NEによって調節されているという報告が多数認められるためである。LPS感受性のマウスC3H/HeNに5μg LPSを腹腔内投与し、経時的に青斑核を摘出した。そのサンプル中のNE含有量をHPLCで定量した。また、サンプルからtotal RNAを抽出し、quantitative real-time PCRで炎症性サイトカインであるIL-1β、TNF-αのmRNA発現量を定量した。LPS投与4時間で増加したNEは6時間後に定常状態に戻り、24時間後に有意に減少した。IL-1βおよびTNF-αのmRNAは、2時間後から有意な増加が認められ、4時間後にそれぞれ13.1倍、4.5倍に増加した。その後、一旦定常状態まで戻るが、15時間後に再び有意な増加が認められ、それぞれの発現量は対照の3.5倍、1.9倍であった。以上の結果については、北米神経科学会、日本神経化学会、日本生理学会において発表した。また、欧文雑誌に投稿準備中である。現在、マウス新生仔から調製したミクログリアを用いて、LPS投与4時間後のNEの代謝回転上昇とIL-1β、TNF-αの発現上昇、15時間後のIL-1β、TNF-αの発現上昇と24時間後のNE減少との間に関連性があるのかどうかを検討中である。また、24時間後のNE減少が、神経細胞のアポトーシスによるものかどうかを検討している。

迄今为止，该机制已显示出脂波利·萨卡（Lipopoli Sakka Ride）（LPS）是小鼠腹腔中施用的一种克阴性细菌，增加了中枢神经系统中Noruepinefrins（NE）的代谢旋转。但是，尚未揭示新陈代谢增加的意义。此外，六个小时后，NE的增加回到稳态，但尚未分析这些变化。因此，测量了8小时LPS后NE的变化和炎症细胞因子的表达。关注炎症性细胞因子，人们认为儿茶酚胺和细胞因子在神经和免疫系统中起重要作用，并且中枢神经系统中炎症性细胞因子的表达是由NE调整的。用LPS敏感的小鼠将5μgLps施用到小鼠C3H/HEN中，并随着时间的推移去除蓝点。样品中的NE含量通过HPLC定量。此外，从样品中提取总RNA，以及IL-1β和TNF-α的mRNA表达量，TNF-α是一种炎性细胞因子，这是具有定量实时PCR的炎性细胞因子。 NE在4小时内增加了六个小时后六个小时后恢复到稳态，并在24小时后显着下降。 IL-1β和TNF-αmRNA通过在两个小时后显着增加，在四个小时后增加了13.1倍和4.5倍。在那之后，它恢复了稳定状态，但是在15小时后再次确认了显着增加，表达量为对比度的3.5倍和1.9倍。结果在北美神经病学学会，日本神经病学会和日本生理学学会宣布。此外，我们准备在欧洲杂志上发布。目前，使用小鼠新幼犬制备的小胶质细胞，NE的代谢旋转在LPS给药后4小时，IL-1β，TNF-α上升，IL-1β，TNF-α升高，我们将在15小时后升高。 24小时后NE减少之间没有相关性。他还在考虑24小时后的NE降低是否是由于神经细胞凋亡引起的。