心血管系疾患におけるAPV受容体の生理機能に関する研究

APV受体在心血管疾病中的生理功能研究

• 批准号: 14760214
• 负责人: 石田 純治
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14760214/
• 关键词: 7回膜貫通型受容体; 心血管系; 血圧制御; 細胞内シグナル伝達系路; 遺伝子欠損マウス; 遺伝子導入マウス

近年、心血管系疾患において三量体G蛋白質と共役している7回膜貫通型受容体からのシグナルが、その病態の進行や抑制に重要であることが判ってきた。本研究は、心血管系、特に血管内皮細胞や心臓を中心に発現している機能未知のマウス7回膜貫通型受容体・APV(AT1-related apelin/virus)受容体に関して、(1)APV受容体の細胞内情報伝達経路の解明と、(2)APV受容体の遺伝子操作マウスを用いて、組織・個体レベルにおける血圧制御、動脈硬化症、心筋症や心肥大に対するAPV受容体の生理作用を解明することを目的としている。(1)APV受容体の細胞内情報伝達経路の解明これまでにAPV受容体安定発現細胞株を樹立し、細胞内情報伝達として三量体G蛋白質のうちGiと共役していること、さまざまな生理作用を担うリン酸化酵素であるERK、Aktを活性化することを明らかにしている。さらにERKやAktへ至るシグナル伝達経路の同定と、その生理的意義としてアポトーシスの抑制作用を有することを突き止めた。(2)APV受容体の個体機能解析APV受容体を介するシグナルに関して、遺伝子欠損マウス・遺伝子導入マウスを作製することにより正常、消失、増強という3つの状況を準備し、血圧調節・心血管系イベントへの影響を直接詳価する。(1)APV受容体遺伝子欠損マウスの作製:ホモ遺伝子欠損マウスの作出に成功し、APV受容体が血圧降下作用を有すること、また、この血圧降下作用には一醸化窒素(NO)系の活性化を解することを証明した。現在、受容体欠損マウスに高脂肪食負荷を行い動脈硬化進展への影響などを検討している。(2)APV受容体遺伝子導入マウスの作製:血圧調節や各種疾患の進展において極めて重要である血管内皮細胞、血管平滑筋細胞や心筋細胞に着目し、これら細胞特異的にAPV受容体が過剰発現する遺伝子導入マウスの作製を試みた。現在、血管内皮細胞、および血管平滑筋細胞特異的APV受容体遺伝子発現マウスの作製に成功し、その表現型の解析を行っている。

近年来，人们发现与三聚体G蛋白偶联的七次跨膜受体发出的信号对于心血管疾病的进展和抑制具有重要作用。本研究重点关注APV（AT1相关apelin/病毒）受体，这是一种功能未知的小鼠七次跨膜受体，主要在心血管系统，特别是血管内皮细胞和心脏中表达，阐明细胞内信号转导途径。 (2)使用APV受体基因工程小鼠在组织和个体水平上阐明APV受体对血压控制、动脉硬化、心肌病和心脏肥大的生理作用。 (1)APV受体的细胞内信号转导途径的阐明我们建立了稳定表达APV受体的细胞系，发现其与三聚体G蛋白的Gi偶联进行细胞内信号转导，并且多种研究表明：它激活 ERK 和 Akt，这两种磷酸化酶负责生理效应。此外，我们还鉴定了导致ERK和Akt的信号转导通路，并发现其生理意义在于抑制细胞凋亡。 (2)APV受体的个体功能分析对于APV受体介导的信号，我们通过创建基因缺陷小鼠和转基因小鼠制备了正常、消失和增强三种情况，并直接详细分析了血压调节和心血管事件的影响。在（1）APV受体基因缺陷小鼠的创建：我们成功创建了纯合子基因缺陷小鼠，发现APV受体具有降血压作用，而这种降血压作用是由氮氧化物（NO）引起的。已经证明激活是可以理解的。目前，我们正在给受体缺陷小鼠喂食高脂肪饮食，并检查其对动脉硬化进展的影响。 （2）APV受体转基因小鼠的创建：着眼于对血压调节和各种疾病的发生极其重要的血管内皮细胞、血管平滑肌细胞和心肌细胞，在这些细胞中特异性过度表达APV受体的尝试。被用来创造转基因小鼠。目前，我们已成功培育出表达血管内皮细胞和血管平滑肌细胞特异性APV受体基因的小鼠，目前正在分析其表型。

项目成果

Ishida J.: "Inhibitory effect of the small heterodimer partner on hepatocyte nuclear factor-4 mediates bile acid-induced repression of the human angiotensinogen gene"J.Biol.Chem.. 279. 7770-7776 (2004)

Ishida J.：“小异二聚体伴侣对肝细胞核因子 4 介导胆汁酸诱导的人血管紧张素原基因抑制的抑制作用”J.Biol.Chem.. 279. 7770-7776 (2004)

Cooperative interaction of EWS with CBP selectively activates HNF4-mediated transcription

EWS 与 CBP 的协同相互作用选择性激活 HNF4 介导的转录

• 发表时间: 2003
• 期刊: J.Biol.Chem. 278(7)
• 作者: Ishida J.

Ishida J.: "Endothelin-1 regulates cardiac sympathetic innervation in the rodent heart by controlling nerve growth factor expression"J.Clin.Invest.. (印刷中). (2004)

Ishida J.：“Endothelin-1 通过控制神经生长因子表达来调节啮齿动物心脏中的心脏交感神经支配”J.Clin.Invest..（出版中）。

Ishida J.: "An essential role for angiotensin II Type la receptor in pregnancy-associated hypertension with intrauterine growth retardation"FASEB J.. 18. 388-390 (2004)

Ishida J.：“血管紧张素 II Ia 型受体在伴有子宫内生长迟缓的妊娠相关高血压中的重要作用”FASEB J.. 18. 388-390 (2004)