オレキシンレセプターの細胞内情報伝達の解明

阐明食欲素受体的细胞内信号转导

基本信息

批准号：
14704040
负责人：
南浩一郎
金额：
$ 10.15万
依托单位：
University of Occupational and Environmental Health, Japan
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (A)
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

オレキシン受容体は、最近睡眠覚醒にオレキシンが重要な役割を演じていることが示唆されているGタンパク結合受容体である。一方、麻酔薬はすべて就眠作用をもち、その機序に興味が持たれているが、未だにその作用機序は完全に解明されていない。麻酔中の動物の脳内にオレキシンを注入すると、麻酔から直ちに覚醒する事が研究者間で観察されている。これらの事からオレキシンと麻酔就眠作用との間で何らかの関係が考えられるが、詳しい検討は全くなされていない。一方、アフリカツメガエル卵母細胞発現系はCa^<2+>依存性C1^-チャンネルをもち、PLCを介した細胞内Ca^<2+>の変動により、容易にGq蛋白結合受容体への薬物の反応を電気生理学的に解析でき、更に、細胞内リン酸化酵素の解析も同時にできるため、麻酔薬のG蛋白結合受容体に対する作用を解析する手段として非常に有効である。今年度の研究においては昨年に引き続き、オレキシン受容体の細胞内情報伝達系の解明とこれらの麻酔機序との関わりを明らかとするために、オレキシン受容体RNAをアフリカツメガエル卵母細胞発現系に注入し発現させ、吸入麻酔薬や静脈麻酔薬がオレキシA受容体にいかに作用するかを検討した。オレキシン受容体Aは吸入麻酔薬ハロセン、イソフルラン、エンフルラン、ジエチルエーテルによって臨床濃度内で濃度依存性に抑制されていることが明らかとなった。さらにオレキシン受容体Aは静脈麻酔薬ペントバルビツレート、プロポフォール、ケタミンによっても臨床濃度内で濃度依存性に抑制されていることが明らかとなった。予備的な結果であるがオレキシンBに関しては吸入麻酔薬イソフルランや静脈麻酔薬ペントバルビツレートが抑制をしている結果を得た。現在、その機序を検討中であり、プロテインキナーゼCなどの燐酸化酵素などの作用に注目し、今後はこれら機序を中心に明らかにしたいと考えている。

食欲素受体是 G 蛋白偶联受体，最近被认为在睡眠/觉醒中发挥重要作用。另一方面，所有麻醉药都具有催眠作用，尽管人们对这种机制很感兴趣，但其作用机制尚未完全阐明。研究人员观察到，当将食欲素注射到麻醉动物的大脑中时，动物会立即从麻醉中醒来。从这些事实来看，人们认为食欲素与麻醉的催眠作用之间存在某种关系，但尚未进行详细的调查。另一方面，非洲爪蟾卵母细胞表达系统具有Ca ^ 2+ 依赖性C1 ^ 通道，并且很容易通过PLC 由于细胞内Ca ^ 2+ 的波动而被Gq蛋白偶联受体激活。可以对反应进行电生理学分析，同时还可以对细胞内磷酸化酶进行分析，该方法作为分析麻醉剂对 G 蛋白偶联受体影响的手段非常有效。延续去年的研究，今年的研究将利用非洲爪蟾卵母细胞表达系统中的食欲素受体RNA来阐明食欲素受体的细胞内信号转导系统及其与麻醉机制的关系，我们研究了吸入麻醉剂和静脉麻醉剂如何作用于食欲素。 -A受体。结果表明，吸入麻醉药氟烷、异氟烷、安氟烷和乙醚会在临床浓度范围内以浓度依赖性方式抑制食欲素受体 A。此外，发现静脉麻醉药戊巴比妥、丙泊酚和氯胺酮在临床浓度内以浓度依赖性方式抑制食欲素受体A。初步结果表明，吸入麻醉剂异氟烷和静脉麻醉剂戊巴比妥可抑制食欲素 B。我们目前正在研究其机制，重点关注蛋白激酶 C 等磷酸化酶的影响，并希望在未来重点阐明这些机制。