歯周ポケット形成における細菌内毒素とタンパク分解酵素の複合作用

细菌内毒素和蛋白水解酶在牙周袋形成中的联合作用

基本信息

批准号：
14771175
负责人：
山本龍生
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Okayama University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2003
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究の目的は,細菌内毒素(LPS)とタンパク分解酵素(酵素)を単独あるいは複合投与して,歯周ポケット形成における細菌由来物質の複合効果を明らかにすることである。平成14年度は,ポケット形成に最適なLPSと酵素の濃度を単独投与で検討し,それぞれ25μg/μl,2.25unit/μlという条件を得た。また,その条件で複合投与を行い,ヘマトキシリン・エオジン染色標本上で評価した。付着上皮の根尖側移動と骨吸収は複合投与群で最大となり,次いでLPS群であった。好中球数と血管数は複合群で最も多く,その次に酵素群であった。これらから,ポケット形成におけるLPSと酵素の相乗作用が示唆された。またポケット形成の初期と思われる付着上皮の亀裂像は複合群の80%の標本で観察された。平成15年度は複合投与群,LPS群,酵素群,対照群の4群に対して,細胞増殖の点から検討を行った。平成14年度に決定した濃度のLPSと酵素を2,4,8週間単独または複合投与した。屠殺後,固定,脱灰,パラフィン包埋し,頬舌的な切片を作製した。切片をproliferating cell nuclear antigen (PCNA)モノクローナル抗体で染色し,4群の比較を組織定量分析により比較した。PCNA陽性付着上皮基底細胞密度は複合投与群,LPS群,酵素群のいずれも2週目から増加し,複合投与群はLPS群と酵素群よりも高い傾向にあった。付着上皮下のPCNA陽性線維芽細胞密度は4群とも変化はなかった。これらの結果から,LPSと酵素のいずれもが接合上皮の増殖を亢進させることが明らかになった。また,歯周ポケットが形成するときには,細菌由来のLPSやタンパク分解酵素が歯肉溝に入り,正常な状態のときよりも接合上皮の増殖活性が上皮下結合組織の線維芽細胞の増殖活性を上回ることが示唆された。本研究の結論により,結合組織の増殖を促す方法を開発するという,効果的な歯周病予防・治療の方向性が示すことができた。

本研究的目的是单独或联合施用细菌内毒素（LPS）和蛋白水解酶（酶），以阐明细菌物质对牙周袋形成的综合影响。 2002年，我们通过单独给药来研究LPS和酶形成袋的最佳浓度，分别为25μg/μl和2.25unit/μl。另外，在这些条件下进行联合给药并在苏木精和伊红染色的样本上进行评价。联合治疗组中贴壁上皮的根尖迁移和骨吸收最大，其次是LPS组。联合组中性粒细胞和血管的数量最高，其次是酶组。这些结果表明 LPS 和酶在袋形成中具有协同作用。此外，在复合材料组的80%的标本中观察到粘附上皮中的裂缝，这被认为是袋形成的初始阶段。 2003年，从细胞增殖的角度对四组进行了研究：联合给药组、LPS组、酶组和对照组。 LPS 和酶按照 2002 年确定的浓度单独或联合施用 2、4 和 8 周。处死后，将动物固定、脱钙、石蜡包埋，并制备颊舌切片。切片用增殖细胞核抗原（PCNA）单克隆抗体染色，并通过组织学定量分析比较四组。联合给药组、LPS组和酶组中PCNA阳性贴壁上皮基底细胞密度从第2周开始增加，并且联合给药组倾向于高于LPS和酶组。所有四组中贴壁上皮下 PCNA 阳性成纤维细胞的密度均无变化。这些结果表明，LPS 和酶均促进连接上皮增殖。另外，当牙周袋形成时，细菌来源的LPS和蛋白水解酶进入龈沟，与正常情况相比，连接上皮的增殖活性超过上皮下结缔组织中的成纤维细胞的增殖活性。这项研究的结论为有效预防和治疗牙周病指明了方向，那就是开发一种促进结缔组织生长的方法。