歯周ポケット形成における細菌内毒素とタンパク分解酵素の複合作用

细菌内毒素和蛋白水解酶在牙周袋形成中的联合作用

基本信息

批准号：
14771175
负责人：
山本龍生
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Okayama University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2003
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究の目的は,細菌内毒素(LPS)とタンパク分解酵素(酵素)を単独あるいは複合投与して,歯周ポケット形成における細菌由来物質の複合効果を明らかにすることである。平成14年度は,ポケット形成に最適なLPSと酵素の濃度を単独投与で検討し,それぞれ25μg/μl,2.25unit/μlという条件を得た。また,その条件で複合投与を行い,ヘマトキシリン・エオジン染色標本上で評価した。付着上皮の根尖側移動と骨吸収は複合投与群で最大となり,次いでLPS群であった。好中球数と血管数は複合群で最も多く,その次に酵素群であった。これらから,ポケット形成におけるLPSと酵素の相乗作用が示唆された。またポケット形成の初期と思われる付着上皮の亀裂像は複合群の80%の標本で観察された。平成15年度は複合投与群,LPS群,酵素群,対照群の4群に対して,細胞増殖の点から検討を行った。平成14年度に決定した濃度のLPSと酵素を2,4,8週間単独または複合投与した。屠殺後,固定,脱灰,パラフィン包埋し,頬舌的な切片を作製した。切片をproliferating cell nuclear antigen (PCNA)モノクローナル抗体で染色し,4群の比較を組織定量分析により比較した。PCNA陽性付着上皮基底細胞密度は複合投与群,LPS群,酵素群のいずれも2週目から増加し,複合投与群はLPS群と酵素群よりも高い傾向にあった。付着上皮下のPCNA陽性線維芽細胞密度は4群とも変化はなかった。これらの結果から,LPSと酵素のいずれもが接合上皮の増殖を亢進させることが明らかになった。また,歯周ポケットが形成するときには,細菌由来のLPSやタンパク分解酵素が歯肉溝に入り,正常な状態のときよりも接合上皮の増殖活性が上皮下結合組織の線維芽細胞の増殖活性を上回ることが示唆された。本研究の結論により,結合組織の増殖を促す方法を開発するという,効果的な歯周病予防・治療の方向性が示すことができた。

这项研究的目的是单独或组合施用细菌内毒素（LPS）和蛋白水解酶（酶）（酶），以揭示细菌衍生物质对牙周口袋形成的综合作用。在2002年，通过单个给药检查了最佳的LPS和酶的浓度，分别获得了25μg/μL和2.25单位/μL的条件。此外，在这些条件下进行了组合给药，并在苏木精 - 欧世蛋白染色的标本上进行了评估。在联合给药组中最大化附着的上皮的根尖运动和骨吸收，其次是LPS组。中性粒细胞计数和血管计数在联合组中最高，其次是酶基。这些暗示了LP和酶在袖珍形成中的协同作用。另外，在复合材料组的80％的标本中观察到了附着的上皮的裂纹图像，似乎是在袋中形成的早期。 2003年，根据细胞增殖进行了四个组：联合给药组，LPS组，酶组和对照组。在2002年确定的浓度下的LPS和酶单独或组合2,4和8周。屠宰后，制作了固定的，脱钙的，石蜡包裹的和泡泡糖切片。将切片用增殖的细胞核抗原（PCNA）单克隆抗体染色，并通过组织定量分析比较四组的比较。 PCNA阳性粘附的上皮基底细胞的密度从组合给药组，LPS组和酶组的第二周以及联合给药组都高于LPS组和酶组。在所有四个组中，附着上皮下的PCNA阳性成纤维细胞的密度均未变化。这些结果表明，LP和酶都增强了共轭上皮的增殖。此外，当牙周口袋形成时，细菌衍生的LP和蛋白水解酶进入牙龈沟，这表明连接性上皮的增殖活性超过了下皮下结节组织中成纤维细胞的增殖活性，而不是正常状态。这项研究的结论显示了预防和治疗牙周疾病的有效方向，开发了促进结缔组织生长的方法。