担癌状態におけるIDOの腫瘍免疫(免疫寛容)に与える影響に関する基礎的検討

IDO对荷瘤状态肿瘤免疫（免疫耐受）影响的基础研究

• 批准号: 14770646
• 负责人: 佐々木 淳
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: 大分医科大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14770646/
• 关键词: indoleamine 2,3-dioxygenase; tryptophan; natural killer cell; 1-methyl d,l-tryptophan; 腫瘍免疫; NK活性

平成14年度のマウスを用いた検討より、indoleanime 2,3-dioxygenase(IDO)がNK細胞活性の調節因子として重要であり、抗腫瘍活性の維持に重要な役割を担っていることが推測された。本年度はヒト免疫細胞におけるIDOの発現およびIDO、IDOによるtryptophanの代謝産物であるkynurenine、IDO阻害剤である1-methyl d,l-tryptophan(1MT)存在下での免疫細胞の傷害活性の変化について検討した。ヒト末梢血単核球を付着細胞(樹状細胞、マクロファージなど)、非付着細胞(NK細胞、T細胞、B細胞など)に分けてIDOの発現を免疫染色にで検討し、また、negative isolation法を用いて非付着細胞よりNK細胞、T細胞、B細胞を分離し、各々のIDO mRNAの発現をRT-PCR法にて検討した。さらに、ヒトNK活性をIDO、kynurenine、1MTの濃度別に測定した。付着細胞、非付着細胞ともにIDO蛋白の発現が認められた。また、非付着細胞よりT細胞、NK細胞、B細胞のいずれにおいてもIDO mRNAの発現が認められ、IFN-γの添加により発現は増強された。IDOおよびkynurenineの濃度別のNK細胞活性の測定では、有意な相関は認められなかった。一方、1MTの濃度別のNK細胞活性は、1MTの濃度とNK細胞活性の間には負の相関が認められた。NK細胞やT細胞などのエフェクター細胞は樹状細胞やマクロファージ、腫瘍細胞から産生されるIDOにより細胞増殖が抑制されると報告されている。今回の研究では、エフェクター細胞自身がIODを産生し、その阻害によりNK細胞活性が低下したことより、IDOの添加によりNK細胞活性に影響がみられなかったことより、エフェクター細胞が産生するIDOはNK細胞活性に重要な役割を有していると考えられた。

根据2002年对小鼠的研究，推测吲哚胺2,3-双加氧酶（IDO）作为NK细胞活性的重要调节剂，在维持抗肿瘤活性方面发挥着重要作用。今年，我们将研究IDO在人体免疫细胞中的表达以及IDO、IDO诱导的色氨酸代谢物犬尿氨酸和IDO抑制剂1-甲基d,l-色氨酸（1MT）存在下免疫细胞细胞毒活性的变化。我考虑过。将人外周血单核细胞分为贴壁细胞（树突状细胞、巨噬细胞等）和非贴壁细胞（NK细胞、T细胞、B细胞等），通过免疫染色检测IDO表达，并阴性分离NK。使用该方法从非贴壁细胞中分离细胞、T细胞和B细胞，并使用RT-PCR检测每种细胞中IDO mRNA的表达。此外，在不同浓度的 IDO、犬尿氨酸和 1MT 下测量了人类 NK 活性。在贴壁细胞和非贴壁细胞中均观察到 IDO 蛋白的表达。此外，与非贴壁细胞相比，在T细胞、NK细胞和B细胞中观察到IDO mRNA表达，并且该表达通过添加IFN-γ而增强。根据 IDO 和犬尿氨酸的浓度，在 NK 细胞活性的测量中没有观察到显着的相关性。另一方面，关于根据1MT浓度的NK细胞活性，观察到1MT浓度与NK细胞活性之间呈负相关。据报道，树突状细胞、巨噬细胞和肿瘤细胞产生的IDO可抑制NK细胞和T细胞等效应细胞的增殖。本研究中，效应细胞本身产生IOD，抑制IOD会降低NK细胞活性，而IDO的添加对NK细胞活性没有影响，表明效应细胞产生的IDO被认为在NK细胞中发挥重要作用活动。

项目成果

甲斐成一郎, 後藤茂, 田原光一郎, 佐々木淳, 利根重信, 北野正剛: "Indoleamine 2,3-dioxygenase is necessary for cytolytic activity of natural killer cells"Scandinavian Journal of Immunology. 59・2. 177-182 (2004)

Seiichiro Kai、Shigeru Goto、Koichiro Tahara、Jun Sasaki、Shigenobu Tone、Masatake Kitano：“吲哚胺 2,3-双加氧酶对于自然杀伤细胞的细胞溶解活性是必需的”斯堪的纳维亚免疫学杂志 59・2（2004 年）。

甲斐成一郎, 後藤茂, 田原光一郎, 佐々木淳, 川野克則, 北野正剛: "Inhibition of indoleamine 2,3-dioxygenase suppresses NK cell activity and Accelerates tumor growth"Journal of Experimental Therapeutics and Oncology. 3・6. 336-345 (2003)

Seiichiro Kai、Shigeru Goto、Koichiro Tahara、Jun Sasaki、Katsunori Kawano、Masatake Kitano：“抑制吲哚胺 2,3-双加氧酶可抑制 NK 细胞活性并加速肿瘤生长”实验治疗与肿瘤学杂志 3・6。 (2003)