樹状細胞を用いた抗腫瘍効果に関する基礎的解析

树突状细胞抗肿瘤作用的基础分析

• 批准号: 13770718
• 负责人: 橋本 雅彦
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Tokyo Women's Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13770718/
• 关键词: 樹状細胞; 抗腫瘍効果

macrophage-chemotactic protein-1(MCP-1)には単球系の細胞やリンパ球に対する炎症部位への走化作用がある。われわれのこれまでの実験で、担癌マウスの所属リンパ節にはMCP-1の発現が認められなかったことを確認している。今回われわれは、マウス大腿骨より骨髄細胞(BM)を採取し、24穴プレートを用いて、5×10^5個/wellのBMをGM-CSF 500U/mlを添加したRPMI1640で、2週間培養して樹状細胞(DC)を誘導した。この間、経時的にこの培養細胞からRNAを抽出し、RT-PCR法によりMCP-1とmacrophage-inflammatory protein(MIP)、IL-12の発現を検索した。同時に、培養上清中のMCP、IL-12量をELISA法を用いて経時的に測定した。BMから誘導されたDCはRT-PCRのレベルで、MCP-1、MIP、IL-12の発現が認められた。MCP-1、MIPの発現は、IL-12に比べ著明であった。培養上清にMCP-1は100pg/mlレベルでの産生が認められたが、IL-12は検出されなかった。培養上清のMCP-1産生量は培養開始後12〜14日目に最も多かった。DCには強いMCPの発現が認められたことから、腫瘍免疫の際にDCを付加した場合の抗腫瘍効果が誘導されるメカニズムの一つに、DCのMCP分泌による免疫系細胞の動員が示唆された。またMCP-1の観点からは、DCの培養は12日から14日目のものがより効果的ではないかと思われた。

巨噬细胞趋化蛋白-1 (MCP-1) 对单核细胞和淋巴细胞对炎症部位具有趋化作用。我们之前的实验已经证实，在荷瘤小鼠的区域淋巴结中没有观察到MCP-1的表达。这次，我们从小鼠股骨中收集骨髓细胞（BM），并使用 24 孔板在补充有 GM-CSF 500U/ml 的 RPMI1640 中培养 5 x 10^5 BM 细胞/孔 2 周，以诱导树突状细胞。直流）。在此期间，随着时间的推移从培养的细胞中提取RNA，并使用RT-PCR检测MCP-1、巨噬细胞炎症蛋白（MIP）和IL-12的表达。同时，使用 ELISA 测量培养物上清液中 MCP 和 IL-12 的含量随时间的变化。发现源自BM的DC在RT-PCR水平上表达MCP-1、MIP和IL-12。 MCP-1和MIP的表达较IL-12更为明显。在培养物上清液中观察到MCP-1的产生水平为100pg/ml，但没有检测到IL-12。培养上清液中MCP-1的产生量在培养开始后12～14天达到最高。在DC中观察到强MCP表达，表明在肿瘤免疫期间添加DC时诱导抗肿瘤作用的机制之一是通过DC分泌MCP来募集免疫系统细胞。另外，从MCP-1的角度来看，培养DC 12至14天似乎更有效。