トランスジェニックマウスを用いた胃粘膜は通鑑のクローナリテイの解析

转基因小鼠胃粘膜克隆性分析

• 批准号: 13770688
• 负责人: 野村 幸世
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13770688/
• 关键词: 胃癌; クローナリティ; 胃発癌; X染色体不活性化; X染色体; 胃粘膜; 胃; 腫瘍性

Hcmizygote F1マウスは50頭しかそろえられず、50頭にメチルニトロソウレアを投与した。そのうち、投与開始より1年間生存したものは36頭であった。メチルニトロソウレア投与により、その投与濃度にかかわらず、ほぼ100%胃癌の形成が認められた。また、100%に胃以外の臓器にも癌が認められた。担癌臓器はリンパ節、肝臓、肺、脾臓であった。肺以外は胃癌の転移と考えられた。採取した胃はまだすべての解析が終わっていない。すでに解析が終了した5頭においては、すべて組織学的にも担癌であった。5頭のうち2頭は癌が多発していた。これを含む9病変のうち4病変はポリクローナルであった。しかし、これが衝突癌である可能性は否定できるものではない。以上のすでに解析済みのものは、凍結切片にて施行したが、凍結切片では、HE染色像もあまりクリアでない。クローナリテイの解析に使用しているX-gal法そのものは凍結切片でないと不可能であるが、β-galactosidascの免疫染色であれば、パラフィン切片でも可能である可能性があり、今後、これによる解析を検討中である。現在のところ、パラフィン切片に対するβ-galactosidascの免疫染色自体の条件が確率できていない。また、ポリクローナルに見える腫瘍において、真に上皮細胞がポリクローナルであることを証明するために、連続切片におけるケラチンの免疫染色を検討中である。また、発癌剤投与により、X染色体不活化そのものに影響が出た可能性も否定できないため、現在、Homozygousのマウスを作成中であるが、これは出生率が低いため、今だにいる。これが得られたあかつきには、再び、これらにMNUを投与する予定である。

只有50只Hcmizygote F1小鼠，并给予50只甲基硝基库。其中36只动物在开始后一年幸存。甲基硝基库的给药显示胃癌的形成几乎100％，无论其给药浓度如何。此外，100％的患者在胃以外的器官中还发现了癌症。含癌症的器官是淋巴结，肝脏，肺和脾脏。除肺部外，人们认为它具有来自胃癌的转移。对收集的胃的所有分析尚未完成。分析完成的所有五只动物在组织学上都是有益的。五个中有两个患有大量癌症。在包括此的九个病变中，有4个是多克隆的。但是，不能排除这可能是碰撞癌。上述先前分析的项目是使用冷冻切片进行的，但是在冷冻切片中，他染色的图像并不清楚。除非使用冷冻切片，否则无法用于分析克隆性的X-GAL方法，但是如果对β-galactosidasc进行免疫染色，也可以使用石蜡切片，并且目前正在考虑使用此方法的分析。目前，没有可能在石蜡切片本身上对β-半乳糖浆免疫染色的可能性。此外，在研究多克隆的肿瘤中，正在研究串行切片中的角蛋白免疫染色，以证明上皮细胞是真正的多克隆。此外，不可能排除致癌剂对X染色体灭活本身产生影响的可能性，因此目前正在创建纯合小鼠，但由于出生率较低，这仍然存在。一旦获得了此功能，MNU将再次对其进行管理。