モルヒネ身体依存形成に関与するμ受容体遺伝子とプロテインキナーゼCの役割

μ受体基因和蛋白激酶C在吗啡身体依赖性形成中的作用

• 批准号: 13770051
• 负责人: 成田 年
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Hoshi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13770051/
• 关键词: オピオイド受容体; スプライスバリアント; アンチセンス核酸; モルヒネ; 鎮痛効果; モルヒネ身体依存; PKC_γノックアウトマウス; アンチセンス; 消化管輸送能; ノックアウトマウス; モルヒネ依存

本研究では、μ受容体のスプライスバリアントの中でも、それらの存在が明確化されているMOR1およびMOR1Bに着目し、その発現を選択的に抑制することが可能なexon-4およびexon-5のアンチセンス核酸を用いて、morphineの身体依存形成能におけるMOR1およびMOR1Bの役割について検討した。Morphineによる身体依存は注射法に従って形成し、morphine最終投与の2時間後に拮抗薬であるnaloxoneを投与することにより退薬症候を誘発させた。Naloxoneによって誘発されるmorphineの退薬症候のうち、body shakesならびにforepaw tremorはexon-4に対するアンチセンス核酸の脳室内前処置により有意に抑制されたのに対し、naloxone誘発jumpingはexon-5に対するアンチセンス核酸の脳室内前処置により有意に抑制された。さらに、naloxoneによって誘発される嫌悪効果は、exon-4に対するアンチセンス核酸の脳室内前処置によってのみ有意に抑制された。これらのことから、脳内のMOR1とMOR1Bの持続的な刺激はnaloxoneにより誘発される種々の異なったmorphine退薬症候発現において、それぞれ重要な役割を担っている可能性が示唆された。一方、本研究ではさらに、protein kinase C_γ(PKC_γ)の遺伝子ノックアウトマウスを用いて、μ容体作動薬の鎮痛効果ならびに身体依存形成における関与を検討した。その結果、PKC_γ遺伝子ノックアウトマウスでは、μ受容体作動薬による鎮痛効果やG-タンパク質活性化作用が著明に増大し、μ受容体を介した反応性の著しい亢進が認められた。また、PKC_γ遺伝子ノックアウトマウスは、μ受容体の発現そのものには野生型マウスとの間に何ら有意な差がなかったことから、PKC_γ遺伝子はμ受容体のリン酸化により引き起こされる細胞内陥入/再感作反応を調節する主要因子である可能性が示唆された。さらに、PKC_γ遺伝子ノックアウトマウスにおけるnaloxone誘発退薬症候の発現率や体重減少は、野生型マウスと比較して多少の増減は認められたものの有意な差は認められなかった。これらの結果から、morphineの身体依存形成にはPKC_γはほとんど関与していないことが明らかとなった。

在本研究中，我们重点研究了μ受体剪接变体中存在的MOR1和MOR1B，以及可以选择性抑制其表达的外显子4和外显子5的抗炎剂，我们使用有义核酸进行了研究。 MOR1和MOR1B在吗啡的身体依赖性形成能力中的作用。按照注射法建立吗啡的躯体依赖性，在末次吗啡给药2小时后给予拮抗剂纳洛酮诱导戒断症状。在由纳洛酮引起的吗啡戒断症状中，用针对外显子4的反义核酸进行脑室内预处理可显着抑制身体颤抖和前爪震颤，而针对外显子5的反义核酸则显着抑制纳洛酮引起的跳跃。用有义核酸进行脑室内预处理。此外，仅通过用针对外显子4的反义核酸进行脑室内预处理即可显着抑制纳洛酮引起的厌恶作用。这些结果表明，大脑中MOR1和MOR1B的持续刺激可能在纳洛酮引起的各种吗啡戒断症状的表现中发挥重要作用。另一方面，在本研究中，我们利用蛋白激酶C_γ（PKC_γ）基因敲除小鼠进一步研究了mu受体激动剂的镇痛作用及其与身体依赖性形成的关系。结果，在PKC_γ基因敲除小鼠中，μ受体激动剂的镇痛作用和G蛋白激活作用显着增强，并且μ受体介导的反应性显着增强。此外，PKC_γ基因敲除小鼠和野生型小鼠的μ受体表达没有显着差异，提示这可能是调节再敏反应的主要因素。此外，尽管与野生型小鼠相比，PKC_γ基因敲除小鼠纳洛酮引起的戒断症状和体重减轻的发生率略有增加或减少，但没有观察到显着差异。这些结果表明PKC_γ几乎不参与吗啡的身体依赖性形成。

项目成果

成田 年, 大西 織江, 根本 真記, 青木 健, 鈴木勉: "Morphine誘発抗侵害効果の発現に対するphsphinositide 3-kinaseおよびphospholipase Cγの関与"日本神経精神薬理学雑誌. 21. 7-14 (2001)

T. Narita、Orie Onishi、M. Nemoto、Ken Aoki 和 Tsutomu Suzuki：“Phsphinositide 3-kinase 和磷脂酶 Cγ 在吗啡诱导的镇痛作用表达中的参与”，《日本神经精神药理学杂志》21. 7-14（2001 年）。 ）

成田 年, 瀧本 淳, 相馬 仁, 矢島 義識, 水尾 圭祐, 黒木 由夫, 鈴木 勉: "Morphine誘発自発運動促進作用に対する逆耐性形成時のμ-opioid受容体機能変化"日本神経精神薬理学雑誌. 21. 55-61 (2001)

Takashi Narita、Jun Takimoto、Hitoshi Soma、Yoshiki Yajima、Keisuke Mizuo、Yoshio Kuroki、Tsutomu Suzuki：“对吗啡诱导的运动活动促进作用的反向耐受形成过程中 μ-阿片受体功能的变化”《日本神经精神药理学杂志》21。 55-61（2001）

Naiita M, Ohnishi O, Nemoto M, Yajima Y, Suzuki T: "Implication of phosphoinositide 3-kinase in the μ-and δ-opioid receptor-mediated supraspinal antinociception in the mouse"Neuroscience. 113. 647-652 (2002)

Naiita M、Ohnishi O、Nemoto M、Yajima Y、Suzuki T：“磷酸肌醇 3-激酶在小鼠 μ-和 δ-阿片受体介导的脊髓上镇痛中的意义”神经科学。

Narita M, Mizuo K, Mizoguchi H, Sakata M, Narita M, Tseng LF, Suzuki T: "Molecular evidence for the functional role of D_3 receptor in the morphine-induced rewarding effect and hyperlocomotion"J Neurosci. 23. 1006-1012 (2002)

Narita M、Mizuo K、Mizoguchi H、Sakata M、Narita M、Tseng LF、Suzuki T：“D_3 受体在吗啡诱导的奖赏效应和过度运动中的功能作用的分子证据”J Neurosci。

青木 健, 成田 年, 矢島 義識, 鈴木 勉: "薬物依存の形成メカニズム、最近の研究"保健の科学. 43巻2号. 92-101 (2001)

Ken Aoki、Toshi Narita、Yoshiki Yajima、Tsutomu Suzuki：“药物依赖形成机制的最新研究”《健康科学》第 43 卷，第 2. 92-101 期（2001 年）。