ミカヅキモの性フェロモンの情報伝達機構の解析

Mikazukimo中性信息素的信息传递机制分析

• 批准号: 13740451
• 负责人: 関本 弘之
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13740451/
• 关键词: ミカヅキモ; 性フェロモン; 走化性; 情報伝達; 有性生殖

本研究では、これまでの一連の研究で得たミカヅキモの有性生殖に関わる性フェロモン遺伝子を中心に、これらの分子が有性生殖時にどのように協調的に発現制御され、実際の機能に結びつくのかを検討することを目的としている。今年度は、以下のような解析を行った。(1)有性生殖特異的に発現する遺伝子の解析ミカヅキモの有性生殖時に発現する遺伝子群について均一化ライブラリーを構築し、約1000種のESTを得た。それらに加え、約2000種の配列未決定のクローンを用いて、3072スポットからなるDNAマイクロアレイを構築した。得られたマイクロアレイを用いて、有性生殖前後で遺伝子発現レベルの変動が見られたスポットを見出し、その塩基配列を決定したところ、既知の性フェロモンをコードする遺伝子に加えて、ロイシンリッチリピートを持つタンパク質、受容体型プロテインキナーゼをコードすると思われる遺伝子などが新たに見出された。(2)有性分裂を誘導する活性物質の分子生物学的解析有性分裂を誘起する生理活性物質について精製を試みたところ、既知の性フェロモン(PR-IP inducer)と熱安定性、作用に対する光要求性、フェロモン産生条件、分子量などの点において高い類似性が見られたことから、両者の関係を検討するため、酵母を用いて組換え型PR-IP inducerを産生した。組換え型性フェロモンは、PR-IP産生誘導、有性分裂誘起の二つの生理活性を示したが、活性の誘導に必要な時間は異なっており、一つのフェロモンが、異なる誘導機構で複数の生理活性を担っていることが明らかになった。

这项研究旨在调查这些分子如何在Mikazukimo的有性繁殖中表达和调节，我们从一系列先前的研究中获得了这些分子，以及这些分子如何与它们在性生殖过程中的实际功能联系起来。今年，我们进行了以下分析：（1）在有性繁殖中特异性表达的基因分析是为在米库祖基莫（Mikazukimo）性行复制期间表达的基因组构建的均质化文库，并获得了大约1,000种物种的EST。除此之外，大约有2000个未序列的克隆用于构建由3072个斑点组成的DNA微阵列。使用获得的微阵列，发现在性繁殖之前和之后观察到基因表达水平变化的斑点，并确定基本序列。除了编码已知性信息素的基因外，还发现了具有富含亮氨酸的重复序列和基因的新蛋白，这些蛋白被认为编码受体蛋白激酶。 （2）试图净化生理裂变的活性物质的分子生物学分析，试图净化生理活性的物质，诱导性裂变，我们发现与已知的性信息素（PR-IP诱导）的高相似性（PR-IP诱导），在作用，分子生产条件，分子体重等之间进行YES-PR-RESS y rep the Reperant，是一种重新构建的，是一种与之相关的，是一种重新构建的，是一种重新构建的。重组性信息素表现出两种生理活性：诱导PR-IP的产生和性有丝分裂，但是诱导活动所需的时间有所不同，并且发现一种信息素通过不同的诱导机制负责多种生理活动。

项目成果

関本 弘之: "私のおすすめ実験生物-ミカヅキモ-"細胞工学. 21巻10号. 1232-1233 (2002)

Hiroyuki Sekimoto：“我推荐的实验生物体 - Mikazukimo”，《细胞工程》，第 21 卷，第 10 期，1232-1233（2002 年）。

Ryo-hei Fukumoto: "Purification and characterization of a pheromone that induces sexual cell division in the unicellular green alga Closterium ehrenbergii."Plant Physiology and Biochemistry. (in press). (2002)

Ryo-hei Fukumoto：“诱导单细胞绿藻新月藻有性细胞分裂的信息素的纯化和表征。”植物生理学和生物化学。

R.Fukumoto et al.: "Purification and characterization of a pheromone that induces sexual cell division in the unicellular green alga Closterium ehrenbergii"Plant Physiology and Biochemistry. 40. 183-188 (2002)

R.Fukumoto 等人：“诱导单细胞绿藻新月藻有性细胞分裂的信息素的纯化和表征”植物生理学和生物化学。

Y.Tsuchikane et al.: "Sex pheromones that induce sexual cell division in the Closterium peracerosum-strigosum-littorale complex (Charophyta)"Journal of Phycology. (印刷中). (2003)

Y. Tsuchikane 等人：“诱导新月藻-strigosum-littorale 复合体（轮藻门）中性细胞分裂的性信息素”《藻类学杂志》（2003 年出版）。

H.Sekimoto: "Molecular characterization of a novel sex pheromone, PR-IP inducer, in Closterium peracerosum-strigosum-littorale complex"Proceeding of the 26th Annual and the 50th Anniversary Congress of Japanese Society of Phycology and the Third Asian Pac

H.Sekimoto：“Closterium peracerosum-strigosum-littorale 复合体中一种新型性信息素、PR-IP 诱导剂的分子特征”日本藻类学会第 26 届年会和第 50 周年纪念大会以及第三届亚洲太平洋会议论文集