骨関節組織の老化変性の発生機序と、細胞寿命・老化の克服による関節再生修復法の開発

骨关节组织老化退化机制及克服细胞寿命和衰老的关节再生修复方法的发展

基本信息

批准号：
13671497
负责人：
遊道和雄
金额：
$ 1.73万
依托单位：
Toyama Medical and Pharmaceutical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2003
项目状态：
已结题

项目摘要

我々は、慢性リウマチ(RA)における傍関節性骨粗鬆症の発症機序を骨芽細胞の細胞寿命・細胞老化の観点から分析することを試み、骨芽細胞の寿命がRAの傍関節性骨粗鬆症に影響することを確認した。また、テロメアの逆転写酸素であるテロメラーゼを誘導することにより骨芽細胞寿命の延長を成し得ることが立証された。1.骨芽細胞活性及び細胞寿命の加齢に伴う変化RA、変形性関節症(OA)群とともに加齢に伴う骨芽細胞(初代培養)の増殖能、骨芽細胞活性、骨基質合成能及び細胞分裂可能回数の低下がみられ、平均テロメア長にも経年的な短縮傾向を認めた。両疾患群ともに、初代培養骨芽細胞の平均テロメア長と細胞寿命は有意な正の相関が見られた。同年齢間で比較すると、骨芽細胞の細胞活性・増殖能、骨基質合成能、細胞分裂回数及びテロメア長はいずれもRA症例がOA症例よりも低値を示した。RA、OA患者から分離されたすべての骨芽細胞群からは、本研究継代培養期間を通じてテロメラーゼ活性は検出されなかった。2.hTERT cDNA導入骨芽細胞の細胞寿命及び細胞活性培養骨芽活性には、テロメラーゼを構成する3コンポーネントのうちhTRとhTP1は発現していたが、hTERTの発現は検出されなかった。hTERT cDNA導入骨芽細胞には、hTR, hTP1とともにhTERTが発現しており、テロメラーゼ活性が確認された。hTERT cDNAを導入した骨芽細胞は、コントロール細胞に比べて有意に細胞寿命が延長された。コントロール細胞では継代が進むに従い骨芽細胞活性及び骨基質合成能が低下するのに対して、hTERT導入骨芽細胞では長期的に維持される傾向がみられた。

我们尝试从成骨细胞寿命和细胞衰老的角度分析慢性类风湿性关节炎（RA）关节旁骨质疏松的发病机制，发现成骨细胞寿命影响RA关节旁骨质疏松。研究还表明，通过诱导端粒酶（端粒的逆转录氧）可以延长成骨细胞的寿命。 1.与年龄相关的成骨细胞活性和细胞寿命的变化。除RA和骨关节炎（OA）组外，与衰老相关的成骨细胞（原代培养物）增殖能力、成骨细胞活性和骨基质合成能力可能数量减少观察到细胞分裂，平均端粒长度有随时间缩短的趋势。在两个疾病组中，原代培养的成骨细胞的平均端粒长度和细胞寿命之间观察到显着的正相关。与同龄患者相比，RA病例的成骨细胞活性/增殖能力、骨基质合成能力、细胞分裂频率和端粒长度值均低于OA病例。在本研究的传代培养期间，从 RA 和 OA 患者分离的所有成骨细胞组中均未检测到端粒酶活性。 2.导入hTERT cDNA的成骨细胞的细胞寿命和细胞活性培养的成骨细胞活性显示，端粒酶的三种成分中，hTR和hTP1表达，但未检测到hTERT表达。在导入hTERT cDNA的成骨细胞中，hTERT与hTR和hTP1一起表达，并且确认了端粒酶活性。转染 hTERT cDNA 的成骨细胞比对照细胞具有显着更长的细胞寿命。在对照细胞中，成骨细胞活性和骨基质合成能力随着传代的进展而降低，而在hTERT转导的成骨细胞中，它们往往会维持很长一段时间。