Armadilloと直接相互作用する新規癌抑制遺伝子産物D6の解析

与犰狳直接相互作用的新型抑癌基因产物D6的分析

• 批准号: 02J61415
• 负责人: 西田 歩
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02J61415/
• 关键词: ショウジョウバエ; Winglessシグナル伝達経路; Armadillo; E2F-1; PCNA; CyclinA; 細胞周期

ショウジョウバエのセグメントポラリティ遺伝子armadillo(arm)の遺伝子産物は、細胞接着因子E-カドヘリンの裏打ち蛋白質、Wingless(Wg)シグナルの伝達、Wgシグナル伝達経路の下流での転写の制御などの多くの機能を有している。Armの様々な機能は、この蛋白質と結合する因子の多様性に起因すると考えられる。本研究では、Yeast two-hybrid法によって新たなArm結合蛋白質を検索し、新規遺伝子sunspot(旧名d6)を見出して機能を解析し、以下の事実を明らかにした。1)Sunspot蛋白質は368アミノ酸をコードし、C末端側235-307アミノ酸の領域でArmと結合する。また、N末端側にはBED fingerモチーフが存在しDNAと結合すると考えられる。2)Sunspotの生体内での機能を明らかにするためにsunspot遺伝子の変異体を作成したところ、sunspot変異体は幼虫から蛹に変態できないことが明らかとなった。さらにsunspot変異体の成虫原基を組織学的に観察すると、正常アリルの成虫原基と比較して著しく小型であることが判明した。3)そこで、Sunspot蛋白質が細胞周期制御に重要な役割を果たしている可能性があると考え、細胞周期制御因子の発現への影響を解析し、SunspotはE2F-1及びPCNAの転写を正に制御することを明らかにした。これらの結果より、sunspotはショウジョウバエの発生過程において成虫原基などの細胞に細胞周期制御遺伝子の転写を誘導する活性をもつ細胞の増殖に必須な遺伝子であることが明らかになった。

果蝇节段极性基因犰狳（arm）的基因产物具有多种功能，包括细胞粘附因子E-cadherin的衬里蛋白、Wingless（Wg）信号的传递以及Wg信号下游转录的控制我正在做。 Arm 的各种功能被认为是由于与该蛋白质结合的因素的多样性所致。在本研究中，我们利用酵母二杂交方法寻找新的Arm结合蛋白，发现了一个新基因sunspot（原名d6），并分析了其功能，揭示了以下事实。 1) Sunspot 蛋白编码 368 个氨基酸，并在 235-307 个氨基酸的 C 端区域与 Arm 结合。此外，N 端有一个 BED 指状基序，被认为可以与 DNA 结合。 2）为了阐明太阳黑子在体内的功能，我们创建了太阳黑子基因的突变体，发现太阳黑子突变体无法从幼虫变态为蛹。此外，对太阳黑子突变体的成虫盘的组织学观察表明，它们明显小于正常等位基因的成虫盘。 3）因此，我们认为Sunspot蛋白可能在细胞周期调控中发挥着重要作用，并分析了其对细胞周期调控因子表达的影响，发现Sunspot对E2F-1的转录有正向调节作用，PCNA也宣布了这一点。会。这些结果表明，太阳黑子是细胞增殖的必需基因，在果蝇发育过程中具有诱导成虫盘等细胞中细胞周期控制基因转录的活性。

项目成果

Keiko Haraguchi: "Activation of beta-catenin-TCF-mediated transcription by non-receptor tyrosine kinase v-Src."Biochemical and Biophysical Research Communications. 313(4). 841-844 (2004)

Keiko Haraguchi：“非受体酪氨酸激酶 v-Src 激活 β-连环蛋白-TCF 介导的转录。”生物化学和生物物理研究通讯。