マウスを用いた脳マラリア発症に関与する宿生遺伝子の解析

使用小鼠分析参与脑型疟疾发病的宿主基因

基本信息

批准号：
13780661
负责人：
大野民生
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究は脳マラリア発症に関与する宿主遺伝子を単離・同定することを最終目的として、昨年度に引き続き、ネズミマラリア原虫(Plasmodium berghei ANKA)感染に対して脳マラリア感受性を示すCBA/N系統と抵抗性のDBA/2系統の交雑群を用いた連鎖解析より、脳マラリア発症に関与する宿主遺伝子の存在領域の特定を試みた。CBA/N系統とDBA/2系統から戻し交配群を作成し、各個体に8〜10週齢でP.berghei ANKAを5×10^6個感染させ、脳マラリアを発症する個体を調べた。220匹の戻し交配個体のうち68匹が脳マラリアを発症し、これらの個体について全ゲノム領域をカバーするように設定した58種のマイクロサテライトマーカーの遺伝子型をPCR-SSLP法により判定した。χ^2検定により各遺伝子型の期待分離比(1:1)が有意に分離比が偏っている(P<0.01)マーカーを調査した。その結果、4種の染色体(Chr.1,11,14,16,17)上に分離比が極端に偏っているマーカーが見出され、これらの染色体上には脳マラリア感受性遺伝子の存在が示唆された。これまでに、本研究で用いた脳マラリア感受性系統は別のマウス系統(C57BL/6J)を用いた連鎖解析により、脳マラリア発症に関与する3箇所の染色体領域が明らかになっているが、本研究で示された領域はこれらとは重複していなかった。したがって、脳マラリアの発症には多数の遺伝子が関与しており、それぞれの感受性系統(CBA/N, C57BL/6J)が異なる遺伝子により支配されていると考えられた。

本研究的最终目的是分离和鉴定参与脑型疟疾发生发展的宿主基因。继去年之后，本研究将继续研究脑型疟疾易感株CBA/N和脑型疟疾感染的耐药株。伯氏疟原虫 ANKA。我们尝试通过使用 DBA/2 菌株杂交组进行连锁分析来鉴定参与脑型疟疾发病的宿主基因区域。由CBA/N品系和DBA/2品系创建回交组，每个个体在8至10周龄时感染5 x 10^6 伯氏疟原虫ANKA，以调查哪些个体会患上脑型疟疾。在220只回交动物中，68只患上了脑型疟疾，使用PCR-SSLP方法确定了覆盖这些动物整个基因组区域的58个微卫星标记的基因型。使用 χ^2 检验研究每个基因型的预期分离比（1:1），以找出分离比显着偏倚（P<0.01）的标记。结果，在4条染色体（Chr.1、11、14、16、17）上发现了分离比例极其偏向的标记，表明这些染色体上存在脑型疟疾易感基因。此前，使用不同的小鼠品系（C57BL/6J）对本研究中使用的脑型疟疾易感品系进行连锁分析，揭示了参与脑型疟疾发展的三个染色体区域，这些区域与本研究中提出的区域并不重叠。因此，认为许多基因与脑型疟疾的发病有关，并且每种易感株（CBA/N、C57BL/6J）受不同基因控制。