ミクロHPLC用電気化学フローセルの開発と応用

微量高效液相色谱电化学流通池的研制及应用

• 批准号: 13771351
• 负责人: 角田 誠
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13771351/
• 关键词: HPLC; 電気化学検出; フローセル; COMT

昨年度開発したクーロメトリックフローセルの応用として、開発したフローセルを用いた分析法の開発を行った。具体的には、下記の二つの分析法の開発を行った。はじめに、カテコールアミンを基質としたcatechol-O-methyltransferase (COMT)活性測定法に開発したフローセルを応用した。COMT活性化剤及び阻害剤探索のためのスクリーニング法の開発を、フローインジェクション分析(FIA)法を用いて行った。また、ヒト高血圧とCOMTの関連を調べる目的で、ヒト赤血球中COMT活性測定法を確立した。ラット組織(肝臓、腎臓など)中のCOMT活性についても測定が可能であった。次に、ドーパミンの酸性代謝物である3,4-dihydroxyphenylacetic acidとhomovanillic acidの同時分析法の開発を行った。この分析法は、ラット腎透析液に適用可能であり、今後、腎におけるドーパミン代謝を調べる上で有用な方法であると期待される。開発したフローセルを検出器として応用するため、3電極方式のセルの検討を現在行っているところである。

作为去年开发的库仑流动池的应用，我们开发了一种使用所开发的流动池的分析方法。具体来说，我们开发了以下两种分析方法。首先，我们将开发的流动池应用于使用儿茶酚胺作为底物测量儿茶酚-O-甲基转移酶（COMT）活性的方法。使用流动注射分析 (FIA) 开发了一种寻找 COMT 激活剂和抑制剂的筛选方法。此外，为了研究人类高血压与COMT之间的关系，我们建立了一种测量人类红细胞中COMT活性的方法。还可以测量大鼠组织（肝、肾等）中的 COMT 活性。接下来，我们开发了一种同时分析多巴胺酸性代谢物 3,4-二羟基苯乙酸和高香草酸的方法。该分析方法可应用于大鼠肾脏透析液，有望成为未来研究肾脏多巴胺代谢的有用方法。为了将开发的流动池用作检测器，我们目前正在研究三电极池。

项目成果

N.Aoyama, M.Tsunoda, K.Nakagomi, K.Imai: "A rapid assay method for catechol-O-methyltransferase activity by flow injection analysis"Biomedical Chromatography. 16. 255-260 (2002)

N.Aoyama、M.Tsunoda、K.Nakagomi、K.Imai：“通过流动注射分析快速测定儿茶酚-O-甲基转移酶活性的方法”生物医学色谱法。

N.Aoyama, M.Tsunoda, K.Nakagomi, K.Imai: "A rapid assay method for catechol-O-methyltransferase activity by flow injection analysis"Biomedical Chromatography. (in press). (2002)

N.Aoyama、M.Tsunoda、K.Nakagomi、K.Imai：“通过流动注射分析快速测定儿茶酚-O-甲基转移酶活性的方法”生物医学色谱法。

M.Tsunoda, K.Takezawa, M.Masuda, K.Imai: "Rat liver and kidney catechol-O-methyltransferase activity measured by high-performance liquid chromatography with fluorescence detection"Biomedical Chromatography. 16. 536-541 (2002)

M.Tsunoda、K.Takezawa、M.Masuda、K.Imai：“通过高效液相色谱法和荧光检测测定大鼠肝脏和肾脏儿茶酚-O-甲基转移酶活性”生物医学色谱法。

M.Masuda, M.Tsunoda, Y.Yusa, S.Yamada, K.Imai: "Assay of catechol-O-methyltransferase (COMT) activity in human erythrocytes using norepinephrine as a natural substrate"Annals of Clinical Biochemistry. 39. 589-594 (2002)

M.Masuda、M.Tsunoda、Y.Yusa、S.Yamada、K.Imai：“使用去甲肾上腺素作为天然底物测定人红细胞中儿茶酚-O-甲基转移酶 (COMT) 活性”临床生物化学年鉴。

M.Tsunoda, K.Takezawa, T.Yanagisawa, M.Kato, K.Imai: "Determination of catecholamines and their 3-O-methyl metabolites in mouse plasma"Biomedical Chromatography. 15. 41-44 (2001)

M.Tsunoda、K.Takezawa、T.Yanagisawa、M.Kato、K.Imai：“小鼠血浆中儿茶酚胺及其 3-O-甲基代谢物的测定”生物医学色谱法。