変異Ki-Rasにより発現制御される癌関連遺伝子の同定・機能解析

突变Ki-Ras调控表达的癌症相关基因的鉴定和功能分析

基本信息

批准号：
13214081
负责人：
白澤専二
金额：
$ 4.54万
依托单位：
Research Institute, International Medical Center of Japan
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13214081/
关键词：
Ki-ras 大腸癌 epiregulin Mig-6 遺伝子欠損マウス癌関連遺伝子

项目摘要

大腸癌細胞株とそれらの活性化Ki-rasを特異的に欠損させた細胞を利用することにより、活性化Ki-rasにより直接的、間接的に発現制御される癌関連遺伝子を同定し、さらにそれらの分子と会合する分子も癌関連遺伝子の候補として単離し、それらの機能を細胞生物学的に、また遺伝子破壊マウスを樹立することにより解明することを目的とする。この解析の結果は、変異Ki-rasの発癌における役割を解明するのみならず、新規の癌関連遺伝子およびそれらと会合する分子の同定・機能解析は、その他の癌発生における分子機能の解明につながると考えられる。本年度は、変異Ki-rasにより発現制御される遺伝子の同定・機能解析とそれらの分子に会合する分子も癌関連遺伝子として同定し、以下のことを明らかにした。(1)活性化Ki-rasにより発現誘導されるEGFファミリーに属するepiregulinがAPC^<Min>マウスの腸管ポリープで、ポリープの増大に伴い発現が上昇してくることを見出し、更にepiregulin遺伝子欠損マウスを樹立し、epiregulin欠損マウスの解析及びepiregulinとAPC^<Min>マウスの交配を開始した。(2)活性化Ki-rasにより発現制御される遺伝子としてアダプター分子と考えられるMig-6を同定し、Mig-6がNF_KBの経路を活性化している所見を得た。又、Mig-6と会合する分子として、Ring fingerドメインを持ち、酵母よりヒトに至るまで強く保存されているMigBP#3を単離し、定型通りにMigBP#3ヘテロマウスの樹立を行った。(3)活性化Ki-rasにより発現制御される新規の遺伝子としてSEPTを単離し、SEPT遺伝子欠損マウス作製のためのES細胞・キメラマウス樹立を行った。又、SEPTと会合する分子として、他種類の癌細胞株で強発現しているSEPT BP#1を単離した。

通过使用特别缺乏激活的 Ki-ras 的结直肠癌细胞系及其细胞，我们鉴定了其表达直接或间接受激活的 Ki-ras 调节的癌症相关基因，并且进一步我们的目标是分离与这些分子相关的分子：癌症相关基因的候选者，并通过细胞生物学和建立基因破坏的小鼠来阐明其功能。该分析的结果不仅将阐明突变型 Ki-ras 在致癌作用中的作用，而且对新的癌症相关基因和与其相关的分子的鉴定和功能分析将有助于阐明其他癌症中的分子功能。是这样认为的。今年，我们鉴定了表达受突变型Ki-ras调节的基因并进行了功能分析，还鉴定了与这些分子相关的分子作为癌症相关基因，并阐明了以下内容。 (1)我们发现，属于EGF家族、由激活的Ki-ras诱导表达的上皮调节蛋白，在APC^<Min>小鼠的肠息肉中随着息肉的增加而增加，此外，我们发现上皮调节蛋白，属于EGF家族，其表达受激活的Ki-ras诱导，随着息肉大小的增加而增加。我们建立了上皮调节蛋白，分析了上皮调节蛋白缺陷小鼠，并开始与APC^<Min>小鼠繁殖上皮调节蛋白。 (2)我们鉴定了被认为是衔接分子的Mig-6是其表达受激活的Ki-ras控制的基因，并发现Mig-6激活NF_KB途径。此外，我们分离了具有环指结构域并且从酵母到人类高度保守的MigBP#3作为与Mig-6结合的分子，并以标准方式建立了MigBP#3杂合小鼠。 (3)我们分离出SEPT这一新基因，其表达受激活的Ki-ras调控，并建立ES细胞和嵌合小鼠，产生SEPT基因缺陷小鼠。我们还分离出 SEPT BP#1，它在其他类型的癌细胞系中强烈表达，作为与 SEPT 相关的分子。