Tyk2ノックアウトマウスを用いたIL-12のシグナル伝達の解析

使用 Tyk2 敲除小鼠分析 IL-12 信号转导

基本信息

批准号：
13214037
负责人：
松田正
金额：
$ 1.54万
依托单位：
Toyama Medical and Pharmaceutical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13214037/
关键词：
IL-12 Tyk2 ノックアウトマウスシグナル伝達サイトカイン

项目摘要

サイトカインのシグナル伝達におけるJakファミリーキナーゼの重要性は十分理解されているが、その中でTyk2キナーゼは、当初IFNαのシグナル伝達に必須のキナーゼとして同定された。In vivoでのTyk2の役割を明確にするために我々はTyk2欠損マウスを作成し、Tyk2はIFNαの大部分のシグナル伝達に必須ではないことを明らかにした。さらにIFNα以外にその刺激によりTyk2を活性化する抗癌サイトカインとして知られるIL-12のシグナル伝達にTyk2が重要であることも示したが、今回さらにIL-12とならび生体内の抗癌作用に重要なlFNY誘導サイトカインであるIL-18についてTyk2欠損マウスを用いて検討した。IL-18は、Jak-STAT経路ではなく、NF-κBを介する経路でそのシグナルを伝達するが、Tyk2欠損マウス由来脾細胞では、野生型マウスと比べIL-12刺激時に約1/6、IL-18刺激時に約1/3とNK細胞活性が減少していた。また、IL-12,IL-18刺激によるT細胞の増殖にはTyk2の欠損は影響を与えなかったが、IL-12,IL-18刺激によるIFNγの産生は著明に低下していた。野生型マウスでIL-12刺激時にみられるT, NK細胞におけるIL-18レセプターの発現亢進が、Tyk2欠損マウス由来T, NK細胞では見られておらず、このことがJak-STAT経路ではなく、MAPキナーゼ、NF-κBを介する経路をシグナル伝達に用いるIL-18の作用がTyk2の欠損により傷害される機序の一つとして考えられる。現在、これらサイトカインによる抗癌メカニズム解明に向けてTyk2ノックアウトマウス及び野生型マウス由来脾細胞をIL-12及びIL-18刺激により新たに誘導される遺伝子発現をMicroarray法により解析中であり、同定された新たな遺伝子の解析も進める予定である。

众所周知，JAK家族激酶在细胞因子信号传导中的重要性，其中TYK2激酶最初被鉴定为IFNα信号传导的必不可少的激酶。为了阐明TYK2在体内的作用，我们创建了TYK2缺陷型小鼠，表明TYK2对于大多数IFNα的信号不是必不可少的。除IFNα外，TYK2对于IL-12的信号传导也很重要，IL-12（称为抗癌细胞因子）通过刺激激活TYK2。除IFNα外，我们还研究了使用TYK2缺陷型小鼠在体内对抗癌作用很重要的LFNY诱导的细胞因子。 IL-18通过NF-κB介导的途径传输其信号，而不是通过JAK-STAT途径传输其信号，但是在源自TYK2缺陷型小鼠的脾细胞中，当IL-11被刺激和与野生型野生型小鼠相比，刺激IL-18时，NK细胞活性降低了约1/6。此外，尽管TYK2缺乏对IL-12和IL-18引起的T细胞增殖没有影响，但IL-12和IL-18的IFNγ产生显着降低。在野生型小鼠中IL-12刺激期间观察到的T和NK细胞中IL-18受体的表达增加在源自TYK2缺乏小鼠的T和NK细胞中尚未看到，这被认为是使用MAP KINase和Nf-κB-knody pandoys的IL-18的机制之一。目前，为了通过这些细胞因子阐明抗癌机制，我们目前正在分析由IL-12和IL-18刺激刺激Tyk2敲除小鼠和野生型小鼠的脾细胞新诱导的基因表达，我们计划使用微阵列进行分析，我们计划分析新的基因。