Tyk2ノックアウトマウスを用いたIL-12のシグナル伝達の解析

使用 Tyk2 敲除小鼠分析 IL-12 信号转导

基本信息

批准号：
13214037
负责人：
松田正
金额：
$ 1.54万
依托单位：
Toyama Medical and Pharmaceutical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13214037/
关键词：
IL-12 Tyk2 ノックアウトマウスシグナル伝達サイトカイン

项目摘要

サイトカインのシグナル伝達におけるJakファミリーキナーゼの重要性は十分理解されているが、その中でTyk2キナーゼは、当初IFNαのシグナル伝達に必須のキナーゼとして同定された。In vivoでのTyk2の役割を明確にするために我々はTyk2欠損マウスを作成し、Tyk2はIFNαの大部分のシグナル伝達に必須ではないことを明らかにした。さらにIFNα以外にその刺激によりTyk2を活性化する抗癌サイトカインとして知られるIL-12のシグナル伝達にTyk2が重要であることも示したが、今回さらにIL-12とならび生体内の抗癌作用に重要なlFNY誘導サイトカインであるIL-18についてTyk2欠損マウスを用いて検討した。IL-18は、Jak-STAT経路ではなく、NF-κBを介する経路でそのシグナルを伝達するが、Tyk2欠損マウス由来脾細胞では、野生型マウスと比べIL-12刺激時に約1/6、IL-18刺激時に約1/3とNK細胞活性が減少していた。また、IL-12,IL-18刺激によるT細胞の増殖にはTyk2の欠損は影響を与えなかったが、IL-12,IL-18刺激によるIFNγの産生は著明に低下していた。野生型マウスでIL-12刺激時にみられるT, NK細胞におけるIL-18レセプターの発現亢進が、Tyk2欠損マウス由来T, NK細胞では見られておらず、このことがJak-STAT経路ではなく、MAPキナーゼ、NF-κBを介する経路をシグナル伝達に用いるIL-18の作用がTyk2の欠損により傷害される機序の一つとして考えられる。現在、これらサイトカインによる抗癌メカニズム解明に向けてTyk2ノックアウトマウス及び野生型マウス由来脾細胞をIL-12及びIL-18刺激により新たに誘導される遺伝子発現をMicroarray法により解析中であり、同定された新たな遺伝子の解析も進める予定である。

尽管已充分了解了JAK家族激酶在细胞因子信号传递中的重要性，但TYK2激酶最初被鉴定为IFNα信号传递的必需激酶。为了阐明TYK2在体内的作用，我们创建了一个TYK2缺失的小鼠，表明TYK2对于大多数IFNα信号不是必不可少的。除IFNα外，已经证明TYK2对IL-12的信号传递很重要，IL-12的信号传播被称为抗癌细胞因子，它通过其刺激激活Tyk2，但这一次是IL-12身体。 IL-18通过NF-κB而不是JAK-STAT路线传输信号，但是在源自TYK2缺失的小鼠的脾细胞中，与野生小鼠相比，IL-12的刺激约为1/6。 IL -18在刺激时，NK细胞活性减少了约1/3。 TYK2不受IL-12和IL-18刺激T细胞的影响，但是IL-12，IL-12，IL-18刺激的产生显着降低。在野生型小鼠中IL-12刺激时可以看到IL-18受体在TYK2缺陷的小鼠衍生的T和NK细胞中的增强，在IL-12刺激时可见，这不是JAK-STAT途径。使用MAP激酶和NF-κB进行信号传递的IL-18的作用被认为是由于TYK2缺陷而受伤的机制之一。当前，通过基因表达的微阵列方法分析了微阵列方法，该方法是由IL-12和IL-12和IL-18刺激Tyk2基因敲除小鼠和野生型小鼠衍生的脾细胞细胞以这些细胞因子阐明抗癌机制的。我们计划分析新基因。