ゼブラフィッシュの挿入変異生成法による脊椎動物遺伝子の機能解析

使用斑马鱼插入诱变方法进行脊椎动物基因的功能分析

• 批准号: 13202009
• 负责人: 川上 浩一
• 金额: $ 5.12万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13202009/
• 关键词: ゼブラフィッシュ; トランスポゾン; メダカ; 挿入異変; 遺伝子導入; GFP; トランスジェニック; ユビキチン

本研究では、メダカトランスポゾンTol2因子を用いてゼブラフィッシュにおける効率のよい挿入変異生成法、遺伝子導入法の開発研究を行い、以下の成果を得た。また、ゼブラフィッシュ挿入変異hagoromoの解析を行い、以下の成果を得た。(1)Tol2因子のゼブラフィッシュ生殖細胞系譜における転移頻度を検討し、.転移頻度を大幅に上昇させることに成功した。今後の研究を進める上での大きな、ブレークスルーとなった。(2)Tol2因子にGFP遺伝子を組み込み、GFP発現ベクター、遺伝子トラップベクターを構築した。実際にこれらが使用可能であることを示した。(3)ゼブラフィッシュhagoromo遺伝子のorthologであるマウスDactylin遺伝子産物の生化学的解析を行い、Dactylin遺伝子産物がユビキチンリガ-ゼの構成成分であることを明らかにした。

在本研究中，我们利用青鳉转座子 Tol2 因子在斑马鱼中开发有效的插入诱变和基因转移方法，并获得了以下结果。我们还分析了斑马鱼插入突变体hagoromo并获得了以下结果。 (1)我们研究了Tol2因子在斑马鱼种系谱系中的转移频率，并成功地显着增加了转移频率。这是未来研究的重大突破。 (2)将GFP基因整合到Tol2元件中，构建GFP表达载体和基因捕获载体。我们已经证明这些实际上是可以使用的。 (3)对作为斑马鱼hagoromo基因的直向同源物的小鼠Dactylin基因产物的生化分析表明，Dactylin基因产物是泛素连接酶的组成部分。

项目成果

Maruyama, S.: "Characterization of a mouse gene (Fbxw6) that encodes a homologue of Caenorhabditis elegans SEL-10"Genomics. 78. 214-222 (2001)

Maruyama, S.：“编码秀丽隐杆线虫 SEL-10 同源物的小鼠基因 (Fbxw6) 的表征”基因组学。

川上浩一: "ゼブラフィッシュの挿入変異生成法と脊椎動物の遺伝子機能研究"蛋白質核酸酵素. 46. 2456-2460 (2001)

Koichi Kawakami：“斑马鱼插入诱变方法和脊椎动物基因功能研究”蛋白质核酸酶46。2456-2460（2001）。