初期胚発生システムを支配する母性RNAの局在化・翻訳の時空的制御機構

母体RNA定位和翻译控制早期胚胎发育系统的时空控制机制

基本信息

批准号：
13045004
负责人：
中村輝
金额：
$ 1.98万
依托单位：
University of Tsukuba
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

胚発生の開始には,卵形成の過程で合成され卵内に貯蓄されている母性因子が重要である.これら母性因子の多くは,mRNAとして卵内の特定の領域に局在化し,局在化した領域でのみ時期特異的に翻訳され機能する.このような母性RNAの時間的・空間的制御には,母性RNAとRNP複合体を形成するタンパク質が重要である.しかし,母性RNP複合体を構成するタンパク質やその機能ついては不明である.私たちは,ショウジョウバエの卵形成過程において,Me31Bが,母性RNAの輸送と翻訳とを連携させている,RNP複合体の構成タンパク質であることを明らかにしてきた.本研究では,Me31B複合体を構成する新規タンパク質の同定を行った.まず,抗Me31B抗体を用いた免疫沈降を行い,共沈するタンパク質についてアミノ酸シーケンスを解析した.その結果,新規タンパク質,CG10686を同定した.さらに,特異的抗体を作成し,免疫組織化学染色を行った結果,CG10686はMe31B複合体の新規構成タンパク質であることを明らかにした.CG10686は,配列中にRNA結合モチーフの1つであるRGG配列を持つことから,卵形成過程において母性RNAと直接結合して機能していると考えられた.CG10686とよく似たタンパク質は,酵母,植物,線虫,マウス,ヒトなどおそらくすべての真核生物に存在している.特にイモリにおいては,CG10686ホモログであるRAP55が,Me31Bホモログと同様に,stored maternal RNP particleの構成タンパク質であることが報告されている.以上の結果は,ショウジョウバエMe31B複合体と両生類卵母細胞内のstored maternal RNP particleとが,機能の点でも構成成分の点でも,進化的に保存されていることを予想させた.

母体因子在卵子发生过程中合成并储存在卵子内，对于胚胎发育的启动非常重要。这些母体因子中的许多以 mRNA 的形式定位在卵子内的特定区域，并与母体形成 RNP 复合物的蛋白质RNA 对于母体 RNA 的时间和空间控制非常重要。组成 RNP 复合物的蛋白质及其功能尚不清楚。我们已经证明 Me31B 是 RNP 复合物的组成蛋白，在果蝇卵子发生过程中协调母体 RNA 的运输和翻译。构成 Me31B 复合物的蛋白质。我们使用相同的方法进行了免疫沉淀，并分析了共沉淀蛋白的氨基酸序列，结果，我们鉴定了一种新的蛋白，CG10686。此外，我们创建了一种特异性抗体，并进行了免疫组织化学染色。我们发现CG10686是该复合物的一种新的组成蛋白。CG10686在其序列中具有一个RNA结合基序。由于它具有 RGG 序列，因此人们认为它在卵子发生过程中通过直接结合母体 RNA 发挥作用。与 CG10686 类似的蛋白质可能存在于所有生物体中，包括酵母、植物、线虫、小鼠和人类。在蝾螈中，CG10686 同源物 RAP55 与 Me31B 同源物一样，存在于储存的真核生物中。据报道，该蛋白是母体 RNP 颗粒的组成蛋白，我预计它会存储在 .