分子インプリント法を用いる環境ホルモンの選択的濃縮分析法の開発と応用

分子印迹法环境激素选择性富集分析方法的开发及应用

• 批准号: 13027287
• 负责人: 萩中 淳
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Mukogawa Women's University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13027287/
• 关键词: 人工抗体; 分子インプリント法; 内分泌攪乱物質; 環境ホルモン; ビスフェノールA; 河川水

bisphenol A(BisA)、p-tert-butylphenol(BP)に対する分子インプリントポリマーを調製した。機能性モノマーとして4-ビニルピリジン、架橋剤としてエチレングリコールジメタクリレート、希釈剤としてトルエン、重合開始剤として2,2'-アゾビス(2,4-ジメチルバレロニトリル)を用い、50℃で24時間熱重合した。得られたポリマーの分子認識能をHPLCで評価した。BisAをインプリントしたポリマーは、BisAを強く認識した。しかし、微量のBisAの分析において、インプリントポリマーからのBisAの漏出が問題となる。我々は分析対象物の構造類似体をインプリントすることにより、この問題を解決できることを見出した。そこで、BisAの構造類似体であるBPをインプリントしたポリマーの調製を検討した。その結果、BPインプリントポリマーのBisAおよびBPに対する分子認識能は、ほぼ同程度であった。そこで、BPインプリントポリマーを前処理カラムとして用いるカラムスイッチング法による河川中のBisAの選択的濃縮、分析を検討した。前処理カラムには、BPインプリントポリマーを充填したカラム、分析カラムにCosmosil 5C18-MSを用いた。また、前処理用移動相には、H_2O : methanol=90:10(v/v)、分析用移動相にはH_2O : methanol=50:50(v/v)を用いた。検出は励起波長225mm、蛍光波長310nmで行った。確立した分析法を河川中のBisA分析に適用した。本法の定量下限は、30ppt(注入量、5mL)であり、河川中のBisAの定量に適用可能であった。

制备了双酚A（BISA），P-TERT叔丁醇（BP）的分子烙印聚合物。使用4-乙烯基吡啶作为功能单体，乙二醇二甲基丙烯酸酯作为交联剂，甲苯为稀释剂，将聚合在50°C下进行24小时进行，将其作为稀释剂，2,2'-氮杂素（2,4-二甲基乙烯酸酯）作为polymerization。通过HPLC评估获得的聚合物的分子识别能力。与BISA印在BISA的印迹的聚合物。但是，在分析痕量BISA时，BISA从印迹聚合物中泄漏成为一个问题。我们发现分析物的烙印可以解决这个问题。因此，我们研究了一个聚合物的制备，其中BP是BISA的结构类似物。结果，BP印迹聚合物对BISA和BP的分子识别能力大致相同。因此，研究了使用BP印迹聚合物作为预处理柱进行选择性富集和分析河流中BISA的选择性富集和分析。预处理柱是填充BP印迹聚合物的色谱柱，Cosmosil 5C18-MS用作分析柱。此外，H_2O：甲醇= 90：10（v/v）用作预处理流动阶段，H_2O：甲醇= 50：50（v/v）用作分析流动阶段。在225 mm的激发波长和310 nm的荧光波长下进行检测。已建立的分析应用于河流中的BISA分析。该方法的定量下限为30 ppt（注射量为5 mL），适用于河流中BISA的定量。

项目成果

Jun Haginaka: "Uniformly sized molecularly imprinted polymer for d-chlorpheniramine : Evaluation of retention and molecular recognition properties in aqueous mobile phase"J.Chromatogr.A. 948. 74-84 (2002)

Jun Haginaka：“用于 d-扑尔敏的均一尺寸分子印迹聚合物：水性流动相中保留和分子识别特性的评估”J.Chromatogr.A.

J Haginaka: "LC packing materials for pharmaceutical and biomedical analysis"Chromatography. 23. 1-12 (2002)

J Haginaka：“用于药物和生物医学分析的液相色谱填充材料”色谱法。

Jun Haginaka: "Uniformly sized molecularly imprinted polymers for (S)-naproxen. Retention and molecular recognition properties in aqueous mobile phase"J.Chromatogr.A. 913. 141-146 (2001)

Jun Haginaka：“(S)-萘普生的尺寸均匀的分子印迹聚合物。水性流动相中的保留和分子识别特性”J.Chromatogr.A.