抗転移剤の開発を指向した海洋無脊椎動物からのプロテアーゼ阻害物質の探索

从海洋无脊椎动物中寻找蛋白酶抑制剂以开发抗转移剂

• 批准号: 01J05978
• 负责人: 藤田 雅紀
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01J05978/
• 关键词: プロテアーゼ阻害剤; 海洋天然物; 抗ガン転移; MMP; プロテアーゼ阻害剤; 海洋天然物; 抗ガン転移; MMP

1.日本沿岸各地で採集された海洋無脊椎動物の抽出物、計2608検体について、ガン転移に深く関与していると考えられるカテプシンB、MT1-MMPおよびMMP2に対する阻害アッセイを行った。その結果それぞれの酵素に対して約8%のサンプルが阻害活性を示した。その中から、特に活性が強く、酵素間の選択性に優れたサンプルについてその活性本体の解明を試みた。2.MT1-MMP阻害活性が認められた、高知県二並島産海綿Chribrochalina sp.の抽出物を、各種クロマトグラフィーで順次精製したところ、2つの阻害物質を単離した。阻害物質のスペクトルデータは、既知物質haplosamate Aと完全に一致したが、報告されたデータにいくつかの疑問点を認めたので、詳細な構造解析を行った。その結果、本物質の構造をリン酸化ステロールと改定した。なお、本物質はMT1-MMPをIC_<50>値150-180μg/mLで阻害した。3.和歌山県五ヶ所湾産のPolyclinidae科ホヤの脂溶性抽出物に顕著なMMP2阻害活性が認められた。凍結資料を抽出後、各種クロマトグラフィーにより精製し、活性成分として1-(12-hydroxy)octadecanyl sulfateを単離した。その構造は各種スペクトルデータから、C_<18>の硫酸化アルコールと決定した。本物質はMMP2をIC_<50>値9.0μg/mLで阻害した。4.高知県箱島産海綿、Callyspongia truncataからは、MT1-MMP阻害物質として、既知物質であるhalistanol sulfateとともに、新規化合物であるcallysponginol sulfate Aを得た。本物質の構造は、分光学および化学的な解析からC_<24>の硫酸化された不飽和脂肪酸であることが明らかになった。本阻害剤はMI1-分光学MMPをIC_<50>値15.0μg/mLで阻害した。

1。在组织蛋白酶B，MT1-MMP和MMP2上进行抑制测定，这些抑制作用被认为与癌症转移深深相关，总共有2,608个样本样本，包括从日本海岸收集的海洋无脊椎动物提取物。结果，大约8％的样品表现出每种酶的抑制活性。其中，我们试图阐明样品的活性在活性中特别强，并且在酶之间具有出色的选择性。 2。Chribrochalina sp。的提取物，来自Ninanshima的海绵，高知县具有MT1-MMP抑制活性，通过各种色谱法依次纯化，并分离了两个抑制剂。抑制剂的光谱数据与已知的物质单倍胶A完全一致，但是我们在报告的数据中发现了一些问题，因此进行了详细的结构分析。结果，将该物质的结构修改为磷酸化的固醇。该物质抑制了MT1-MMP，IC_ <50>值为150-180μg/ml。 3。在Wakayama县Gokasho湾的脂溶性提取物中观察到了显着的MMP2抑制活性。提取冷冻材料后，通过各种色谱将其纯化，并将1-（12-羟基）甲基硫酸盐硫酸盐分离为活性成分。从各种光谱数据中确定该结构是C_ <18>的硫化酒精。该物质以9.0μg/ml的IC_ <50>值抑制MMP2。 4。来自高知县Hakojima的海绵Callispongia Truncata获得了一种新型化合物，称为硫酸硫酸硫酸盐A，以及已知的硫酸盐硫酸盐作为MT1-MMP抑制剂。通过光谱和化学分析揭示了该材料的结构是C_ <24>的硫酸化脂肪酸。该抑制剂抑制MI1折射MMP，IC_ <50>值为15.0μg/ml。