抗転移剤の開発を指向した海洋無脊椎動物からのプロテアーゼ阻害物質の探索

从海洋无脊椎动物中寻找蛋白酶抑制剂以开发抗转移剂

基本信息

批准号：
01J05978
负责人：
藤田雅紀
金额：
$ 1.28万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01J05978/
关键词：
プロテアーゼ阻害剤海洋天然物抗ガン転移 MMP

项目摘要

1.日本沿岸各地で採集された海洋無脊椎動物の抽出物、計2608検体について、ガン転移に深く関与していると考えられるカテプシンB、MT1-MMPおよびMMP2に対する阻害アッセイを行った。その結果それぞれの酵素に対して約8%のサンプルが阻害活性を示した。その中から、特に活性が強く、酵素間の選択性に優れたサンプルについてその活性本体の解明を試みた。2.MT1-MMP阻害活性が認められた、高知県二並島産海綿Chribrochalina sp.の抽出物を、各種クロマトグラフィーで順次精製したところ、2つの阻害物質を単離した。阻害物質のスペクトルデータは、既知物質haplosamate Aと完全に一致したが、報告されたデータにいくつかの疑問点を認めたので、詳細な構造解析を行った。その結果、本物質の構造をリン酸化ステロールと改定した。なお、本物質はMT1-MMPをIC_<50>値150-180μg/mLで阻害した。3.和歌山県五ヶ所湾産のPolyclinidae科ホヤの脂溶性抽出物に顕著なMMP2阻害活性が認められた。凍結資料を抽出後、各種クロマトグラフィーにより精製し、活性成分として1-(12-hydroxy)octadecanyl sulfateを単離した。その構造は各種スペクトルデータから、C_<18>の硫酸化アルコールと決定した。本物質はMMP2をIC_<50>値9.0μg/mLで阻害した。4.高知県箱島産海綿、Callyspongia truncataからは、MT1-MMP阻害物質として、既知物質であるhalistanol sulfateとともに、新規化合物であるcallysponginol sulfate Aを得た。本物質の構造は、分光学および化学的な解析からC_<24>の硫酸化された不飽和脂肪酸であることが明らかになった。本阻害剤はMI1-分光学MMPをIC_<50>値15.0μg/mLで阻害した。

1. 使用从日本沿海各地采集的总共 2,608 份海洋无脊椎动物提取物，对组织蛋白酶 B、MT1-MMP 和 MMP2 进行抑制测定，这些物质被认为与癌症转移密切相关。结果，约 8% 的样品对每种酶表现出抑制活性。其中，我们试图阐明活性特别强且酶之间选择性优异的样品的活性。 2.采用多种层析方法纯化来自高知县二并岛的海绵Chribrochalina sp.提取物，该提取物具有MT1-MMP抑制活性，并分离出两种抑制物质。尽管该抑制剂的光谱数据与已知物质haplosamate A的光谱数据完全匹配，但我们认识到报道的数据存在一些疑问，因此我们进行了详细的结构分析。结果，该物质的结构被修改为磷酸化甾醇。此外，该物质对MT1-MMP具有抑制作用，IC_<50>值为150-180μg/mL。 3.和歌山县五所湾海鞘的脂溶性提取物具有显着的MMP2抑制活性。提取冷冻物质后，通过各种层析方法进行纯化，分离出作为活性成分的1-(12-羟基)十八烷基硫酸盐。基于各种光谱数据，其结构被确定为C_ 18 硫酸化醇。该物质抑制MMP2，IC_<50>值为9.0μg/mL。 4.从高知县函岛市的海绵Callysponia truncata中，我们获得了一种新化合物——硫酸软海绵酚A，以及已知的MT1-MMP抑制剂——硫酸哈利斯醇。光谱和化学分析表明该物质的结构是C_24硫酸化不饱和脂肪酸。该抑制剂抑制MI1-光谱MMP，IC_<50>值为15.0μg/mL。