生殖幹細胞の特質の解析

生殖干细胞特性分析

基本信息

批准号：
01J00996
负责人：
大田浩
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01J00996/
关键词：
精原肝細胞移植セルトリ細胞 GFP

项目摘要

精子形成は精原幹細胞の増殖・分化、精母細胞の減数分裂および精子細胞の著しい形態変化を経て最終的に精子を産生する一連の分化過程である。これら一連の分化過程は精原細胞の内、最も未分化な精原幹細胞の増殖・分化により開始される。精原細胞は、細胞核の形態により、A型、B型精原細胞に分類され、さらにA型精原細胞はその細胞の配列様式により、Asingle(As), Apaired(Apr), Aaligned(Aal)に細分化することができる。現在のところ、As型精原細胞が精原幹細胞であると考えられているが、その増殖・分化機構の解析は、培養系などの有効な解析系が存在せず、実験的な証明は困難であった。本研究では新たに開発された精細胞移植法を応用し、雄性不妊マウスの原因解明および精原幹細胞の増殖・分化機構を解析することである。精細胞移植法を応用した解析の結果、移植後の精原幹細胞の分化過程は、精細管内において同調して行なわれていることを示し、また、雄性不妊を示すnectin2欠損マウスの表現型は、セルトリ細胞に発現するnectin2が欠損することにより引き起こされることを証明した。さらに、Sl/Sl^d変異マウスの精巣において引き起こされてるアポトーシスはp53非依存的であることを示し、停留精巣において引き起こされているアポトーシスは、精原細胞から精母細胞までの段階ではp53依存的であるが、それ以降の細胞、すなわち、半数体生殖細胞のアポトーシスはp53非依存的であることを証明した。

精子发生是一系列分化过程，最终通过精子干细胞的增殖和分化而最终产生精子，精子细胞的减数分裂以及精子细胞的显着形态变化。这些分化序列是由精子细胞中最未分化的精子干细胞的增殖和分化引发的。根据细胞核的形态，将精子分类分为A和B精子，并根据细胞的序列格式将精子型型细胞分类为ASingle（AS），Appaired（APR），AALIGNED（APR）（AAL）。目前，人们认为，类型的精子细胞是精子干细胞，但是很难使用其增殖和分化机制在没有有效的分析系统（例如培养系统）的情况下进行实验证明。这项研究应用了一种新开发的精子细胞移植方法来阐明雄性不育小鼠的原因，并分析精子干细胞的增殖和分化机制。使用精子细胞移植方法进行的分析表明，在生激素小管中同步进行了精子干细胞的分化过程，并证明表现出雄性不育症的表型是由Sertoli细胞中表现出的nectin2表现出的。此外，我们证明了在SL/SL/SL^D突变小鼠的睾丸中诱导的凋亡是p53独立的，这表明在隐藻术中诱导的凋亡是p53非依赖于精子的p53非依赖性的，而对于精子阶段，而在精子阶段，则依赖性细胞，即依赖性细胞。