生殖幹細胞の特質の解析

生殖干细胞特性分析

基本信息

批准号：
01J00996
负责人：
大田浩
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01J00996/
关键词：
精原肝細胞移植セルトリ細胞 GFP

项目摘要

精子形成は精原幹細胞の増殖・分化、精母細胞の減数分裂および精子細胞の著しい形態変化を経て最終的に精子を産生する一連の分化過程である。これら一連の分化過程は精原細胞の内、最も未分化な精原幹細胞の増殖・分化により開始される。精原細胞は、細胞核の形態により、A型、B型精原細胞に分類され、さらにA型精原細胞はその細胞の配列様式により、Asingle(As), Apaired(Apr), Aaligned(Aal)に細分化することができる。現在のところ、As型精原細胞が精原幹細胞であると考えられているが、その増殖・分化機構の解析は、培養系などの有効な解析系が存在せず、実験的な証明は困難であった。本研究では新たに開発された精細胞移植法を応用し、雄性不妊マウスの原因解明および精原幹細胞の増殖・分化機構を解析することである。精細胞移植法を応用した解析の結果、移植後の精原幹細胞の分化過程は、精細管内において同調して行なわれていることを示し、また、雄性不妊を示すnectin2欠損マウスの表現型は、セルトリ細胞に発現するnectin2が欠損することにより引き起こされることを証明した。さらに、Sl/Sl^d変異マウスの精巣において引き起こされてるアポトーシスはp53非依存的であることを示し、停留精巣において引き起こされているアポトーシスは、精原細胞から精母細胞までの段階ではp53依存的であるが、それ以降の細胞、すなわち、半数体生殖細胞のアポトーシスはp53非依存的であることを証明した。

精子发生是通过精原干细胞的增殖分化、精母细胞的减数分裂以及精子细胞显着的形态变化，最终产生精子的一系列分化过程。这一系列的分化过程是由精原干细胞的增殖和分化启动的，精原干细胞是精原细胞中未分化程度最高的细胞。根据细胞核的形态，精原细胞可分为A型和B型精原细胞，A型精原细胞根据细胞排列可分为单个（As）、成对（Apr）和对齐（Aal）。细分为目前，As型精原细胞被认为是精原干细胞，但由于没有培养系统等有效的分析系统，很难通过实验分析其增殖和分化机制。在本研究中，我们应用新开发的精子细胞移植方法来阐明小鼠雄性不育的原因，并分析精原干细胞的增殖和分化机制。利用精子细胞移植进行的分析表明，移植后精原干细胞的分化过程在生精小管内同步发生，并且nectin2缺陷小鼠表现出的男性不育的表型是由nectin2表达缺陷引起的。在支持细胞中。此外，我们发现Sl/Sl^d突变小鼠睾丸中诱导的细胞凋亡是p53独立的，而隐睾睾丸中诱导的细胞凋亡在从精原细胞到精母细胞的阶段是p53依赖性的，但随后的细胞凋亡则不同。单倍体生殖细胞的产生被证明是不依赖于p53的。