放射線によるATM依存的なBRCA1蛋白質リン酸化とその意義

辐射诱导的ATM依赖性BRCA1蛋白磷酸化及其意义

• 批准号: 12217117
• 负责人: 鈴木 啓司
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12217117/
• 关键词: p53; 放射線; 細胞老化; 細胞増殖

今年度は以下の知見を新たに得た。1.野生型p53遺伝子を有する正常ヒト細胞において、高い線量ほど細胞老化形質であるSA-β-gal(Senescence-associated β-galactosidase)を発現する細胞の頻度が上昇し、X線照射による老化様細胞増殖停止の誘導に線量依存性があることがわかった。また、野生型p53蛋白質を発言する人癌細胞でも正常ヒト細胞と同様のSA-β-gal発現の線量依存性が認められた。2.野生型p53遺伝子を欠失したヒト肺非小細胞癌NCI-H1299にエクダイソン制御野生型p53遺伝子発現誘導システムを導入し、野生型p53蛋白質の誘導により細胞はGl/S境界で細胞周期を停止すること、Glアレストを起こした細胞においてSA-β-galの発現が見られることを見いだした。さらに、Glアレストを引き起こさないレベルのp53蛋白質の発現ではSA-β-galは誘導されないことから、p53機能活性化による細胞周期停止がある程度持続されることにより老化様の細胞増殖停止プログラムが発動することが明らかになった。3.放射線照射による細胞増殖停止にはp53機能に依存したp21^<WAFI/CIPI>の発現誘導が必要であるが、p21^<WAFI/CIPI>の発現は照射後48時間以降では減少することがわかった。しかしながら、RB蛋白質は脱リン酸化された状態のままであることから、p21^<WAFI/CIPI>とは別のCdk阻害剤が誘導しているのではないかと考えた。そこで、p27、p16、p15、p19について発現レベルを検討したところ、P21^<WAFI/CIPI>の減少に伴ってp16のレベルが上昇することを見いだした。

今年，我们获得了以下新知识。 1. 在携带野生型p53基因的正常人体细胞中，剂量越高，细胞表达SA-β-gal（衰老相关β-半乳糖苷酶）的频率越高，这是一种细胞衰老性状，导致与 X 射线照射引起的衰老作用类似，细胞生长停滞的诱导作用被发现具有剂量依赖性。此外，在表达野生型p53蛋白的人类癌细胞中观察到SA-β-gal表达与正常人类细胞中相同的剂量依赖性。 2.我们将蜕皮激素控制的野生型p53基因表达诱导系统引入缺乏野生型p53基因的人非小细胞肺癌NCI-H1299中，并诱导细胞进入细胞周期Gl/S我们发现在经历G1停滞的细胞中观察到SA-β-gal表达。此外，由于SA-β-gal不被p53蛋白表达以不引起G1停滞的水平诱导，因此通过在某种程度上由于p53功能激活而维持细胞周期停滞而激活衰老样细胞生长停滞程序。变得清晰起来。 3. p21^<WAFI/CIPI>表达的诱导依赖于p53功能，是辐射照射细胞生长停滞所必需的，但据我所知，p21^<WAFI/CIPI>表达在照射后48小时后减少。然而，由于RB蛋白仍处于去磷酸化状态，我们怀疑它是由p21^<WAFI/CIPI>以外的Cdk抑制剂诱导的。因此，我们检查了p27、p16、p15和p19的表达水平，发现p16水平随着P21^<WAFI/CIPI>的减少而增加。

项目成果

Roy,K.: "Hypoxia relieves X-ray-induced delayed effects in normal human embryo cells"Radiation Research. 154. 659-666 (2000)

Roy,K.：“缺氧可缓解 X 射线对正常人类胚胎细胞引起的延迟效应”辐射研究。