放射線によるATM依存的なBRCA1蛋白質リン酸化とその意義

辐射诱导的ATM依赖性BRCA1蛋白磷酸化及其意义

• 批准号: 12217117
• 负责人: 鈴木 啓司
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12217117/
• 关键词: p53; 放射線; 細胞老化; 細胞増殖

今年度は以下の知見を新たに得た。1.野生型p53遺伝子を有する正常ヒト細胞において、高い線量ほど細胞老化形質であるSA-β-gal(Senescence-associated β-galactosidase)を発現する細胞の頻度が上昇し、X線照射による老化様細胞増殖停止の誘導に線量依存性があることがわかった。また、野生型p53蛋白質を発言する人癌細胞でも正常ヒト細胞と同様のSA-β-gal発現の線量依存性が認められた。2.野生型p53遺伝子を欠失したヒト肺非小細胞癌NCI-H1299にエクダイソン制御野生型p53遺伝子発現誘導システムを導入し、野生型p53蛋白質の誘導により細胞はGl/S境界で細胞周期を停止すること、Glアレストを起こした細胞においてSA-β-galの発現が見られることを見いだした。さらに、Glアレストを引き起こさないレベルのp53蛋白質の発現ではSA-β-galは誘導されないことから、p53機能活性化による細胞周期停止がある程度持続されることにより老化様の細胞増殖停止プログラムが発動することが明らかになった。3.放射線照射による細胞増殖停止にはp53機能に依存したp21^<WAFI/CIPI>の発現誘導が必要であるが、p21^<WAFI/CIPI>の発現は照射後48時間以降では減少することがわかった。しかしながら、RB蛋白質は脱リン酸化された状態のままであることから、p21^<WAFI/CIPI>とは別のCdk阻害剤が誘導しているのではないかと考えた。そこで、p27、p16、p15、p19について発現レベルを検討したところ、P21^<WAFI/CIPI>の減少に伴ってp16のレベルが上昇することを見いだした。

今年，我们获得了以下新发现：1。在携带野生型p53基因的正常人细胞中，剂量越高，表达细胞味性SA-β-β-gal的细胞的频率（与衰老相关的β-乳糖苷酶）通过细胞季节性状的炎症，并增加了ISSSESSISINAL，sESSESSSISION IS sESESSISINC剂量依赖性。此外，在说野生型p53蛋白的人类癌细胞中观察到剂量依赖性的SA-β-GAL表达，类似于正常的人类细胞。 2. We introduced the exdyson-regulated wild-type p53 gene expression induction system into human lung non-small cell carcinoma NCI-H1299, which had a deletion of the wild-type p53 gene, and found that by induction of the wild-type p53 protein, cells arrested the cell cycle at the Gl/S boundary, and that expression of SA-β-gal was observed in cells that had经历了GL被捕。此外，由于p53蛋白在不引起GL停滞的水平上的表达不会诱导SA-β-GAL，因此揭示了由p53功能激活引起的细胞周期停滞在某种程度上持续，从而导致衰老样细胞增殖停滞计划。 3。尽管p21^<WAFI/CIPI>取决于p53功能的表达是通过辐射阻止细胞生长的，但发现P21^<WAFI/CIPI>在照射后48小时后的表达降低。但是，由于RB蛋白仍然处于其去磷酸化状态，因此认为它是由P21^<WAFI/CIPI>以外的CDK抑制剂诱导的。因此，当检查了p27，p16，p15和p19的表达水平时，我们发现p16的水平随p21^<wafi/cipi>的降低而增加。

项目成果

Roy,K.: "Hypoxia relieves X-ray-induced delayed effects in normal human embryo cells"Radiation Research. 154. 659-666 (2000)

Roy,K.：“缺氧可缓解 X 射线对正常人类胚胎细胞引起的延迟效应”辐射研究。