CキナーゼとDGキナーゼの神経情報伝達におけるクロストーク機構の解析

C激酶与DG激酶神经信息传递串扰机制分析

基本信息

批准号：
12210107
负责人：
斎藤尚亮
金额：
--
依托单位：
Kobe University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1.PKCのターゲティング機構の解析PKCによる基質タンパク質のリン酸化には、特定の細胞内部位へのPKCターゲティングが必須であることが明らかになった(Ohmori et al.2000)。様々なリピッドメッセンジャーがPKCサブタイプ特異的なターゲティングを引き起こし、細胞死、遺伝子発現、突起伸長などの神経機能に関与していることが示唆された(Kajimoto et al.2001)。これらの事実は、PKCは様々な外界シグナルに応じて、それぞれが目的とする細胞内部位に移動(ターゲティング)し、独自の機能を発現(基質蛋白のリン酸化)を行うことを示唆しており、このターゲティングの多様性が情報伝達因子の多彩な機能発現の基礎となっていることを示唆した。2.DGKのトランスロケーションとそれによるPKCターゲティング制御DGKが細胞外刺激によって、様々なターゲティングを示し、DGKのターゲティングによりPKCターゲティング機構の終了過程を制御することを示した(Shirai et al.2000)。これらの結果は、PKCによるシグナル伝達機構は種々の情報伝達機構との時間的・空間的クロストークによっても巧妙に調節されていることを示唆した。3.Tet制御システムを用いたトランスジェニックマウスの作製種々のプロモーターの制御によって、脳部位特異的にGFP融合型PKCの各サブタイプを発現するトランスジェニックマウスを作製し、脳スライス内でのGFP融合型PKCの可視化に成功した。このトランスジェニックマウスを用いることにより、長期増強・長期抑圧などの電気生理学的現象と情報伝達機構(PKCターゲティング)を同時に、しかも生細胞内で解析することが可能となる。

1. PKC 的靶向机制分析已经表明，PKC 靶向特定的细胞内位点对于 PKC 底物蛋白的磷酸化至关重要 (Ohmori et al. 2000)。有人提出，各种脂质信使会引起 PKC 亚型特异性靶向，并参与神经元功能，如细胞死亡、基因表达和过程生长 (Kajimoto et al. 2001)。这些事实表明，PKC 响应各种外部信号移动到所需的细胞内位点（靶向）并表达其自身的功能（底物蛋白的磷酸化），这表明这种靶向的多样性是信号转导多样化功能表达的基础。因素。 2. DGK易位和PKC靶向的控制我们发现DGK在响应细胞外刺激时表现出多种类型的靶向，并且DGK靶向控制PKC靶向机制的终止过程(Shirai et al.2000)。这些结果表明PKC信号传导机制也受到与各种信息转导机制的时空串扰的精细调节。 3.使用Tet控制系统创建转基因小鼠我们创建了在各种启动子的控制下以脑区域特异性方式表达GFP融合PKC的每种亚型的转基因小鼠，并在脑切片中进行了GFP融合。可视化类型 PKC。通过使用这种转基因小鼠，可以同时分析活细胞内的长时程增强和长期抑制等电生理现象以及信息转导机制（PKC靶向）。