プロスタグランジンの細胞内取り込みと作用発現機構の研究

前列腺素细胞摄取及作用表达机制研究

• 批准号: 62570105
• 负责人: 成宮 周
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1987
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1987 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-62570105/
• 关键词: プロスタグランジン; 細胞周期; G_1期停止; 培養細胞; 蛋白合成; 蛋白合成阻害剤; 熱ショック蛋白

AやJタイプのプロスタグランジン(PG)は培養細胞の増殖を抑制し, ある種の細胞では分化を誘導する. この作用は, 一般のPG作用と異なり, PGが細胞に取り込まれ細胞内で作用を発揮することによるが, その分子機構を明らかにするため以下の研究を行った.1.flow cytometryによるPG処理細胞の細胞動態の解析HeLaS-3細胞を用い, これを低血清下で84時間培養することにより, 細胞周期をG1期に同調した. この細胞に血清を添加することにより, 細胞周期の進行を促し, この進行に対するPGの効果を観察した. その結果, (1)PGJやAは細胞周期の進行をG1期で特異的に停止させること, (2)この停止点はG1/S期境界より数時間G1期に入った点にあること, (3)このようなG1期停止は, PGをG1期細胞に加えたときのみ起こり, 他の細胞周期にある細胞はこのようなPG作用に非感受性をあること, (5)PG処理の際, シクロヘキシミド, エメチンなどの蛋白合成阻害剤を共存させるとPGの増殖停止効果が強く減弱されること, 等が明らかとなった. 以上の結果は, PG作用の標的がG1期細胞内に存在していること, また, 何らかの蛋白合成がPG作用の発現に関係している可能性があることを示唆したものである.2.PG処理細胞による蛋白合成パタンの解析上記の培養細胞系を用い, これを〔^<35>S〕メチオニンでパルスラベルすることにより, コントロール及びPG処理細胞での蛋白合成パタンの変化を解析した. この結果, (1)PG処理により分子量68K, pI5.5〜5.7のいくつかの蛋白が特異的に誘導されること, (2)これらの蛋白は細胞のGI期に一過性にみられる蛋白と同一であり, 更に, 細胞を43°Cにて処理したときに誘導される熱ショック蛋白とも同一であることがわかった. 現在, これらの蛋白のPG作用発現における役割を研究中である.

A型和J型前列腺素（PGs）抑制培养细胞的增殖并诱导某些类型的细胞分化。为了阐明其分子机制，我们进行了以下研究1. PG-的细胞动力学分析。使用流式细胞术处理的细胞使用 HeLaS-3 细胞，通过培养数小时，分析了 PG 处理的细胞在低血清条件下的细胞动力学，通过向这些细胞中添加血清，细胞周期同步至G1期，促进了细胞周期的进展，并且观察到PG对此进展的影响，结果，(1)PGJ和A(2)。该停止点是从 G1/S 期边界进入 G1 期的几个小时； (3) 这种 G1 期停滞导致 PG 仅在添加到阶段细胞时才会发生。其他细胞周期的细胞对这种PG作用不敏感，并且(5)在PG处理过程中共存蛋白质合成抑制剂如放线菌酮和依米丁会强烈减弱PG的生长抑制作用。上述结果表明PG作用的靶点是存在的。在 G1 期细胞内，并且这表明某种蛋白质合成可能与PG作用的表达有关。 2. PG处理细胞的蛋白质合成模式分析使用上述培养的细胞系统，这>S]通过用蛋氨酸进行脉冲标记，我们分析了变化。结果是，(1) PG 处理产生的分子量为 68K；一些pIs为5.5至5.7的蛋白质被特异性诱导；（2）这些蛋白质与细胞GI期短暂观察到的蛋白质相同；我们发现这些蛋白质也与处理时诱导的热休克蛋白质相同。目前，我们正在研究这些蛋白在PG作用表达中的作用。

项目成果

Chno, K.: J. Pharmacol. Exp. Ther.(1988)

Chno，K.：J. Pharmacol。