新規カルモデュリン拮抗薬の抗アポトーシス作用の神経薬理学的研究

新型钙调蛋白拮抗剂抗细胞凋亡作用的神经药理学研究

• 批准号: 11877018
• 负责人: 福永 浩司
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11877018/
• 关键词: カルモデュリン; アポトーシス; 遅発性神経細胞死; 脳虚血; 一酸化窒素合成酵素; 一酸化窒素; 神経保護薬; 海馬; CaMキナーゼII; アストロサイト; カルモデュリン; アポトーシス; 遅発性神経細胞死; 脳虚血; 一酸化窒素合成酵素; 一酸化窒素; 神経保護薬; 海馬; CaMキナーゼII; アストロサイト

新規カルモデュリン拮抗薬であるDY-9760eはin vitroにおいて種々のカルモデュリン依存性酵素を阻害する。白崎ら(第一製薬)はラット中大脳動脈閉塞モデルにおいて虚血に伴う神経細胞死を有意に抑制することを報告した。本研究では新たな作用機構を有する新規脳保護薬、DY-9760eのin vivoにおける作用点を明らかにすることである。マウス神経芽腫細胞N1E-115細胞においてカルシウムイオノフォア、A23187によって誘発されるNO産生に対する効果を検討した。1μM以下の濃度で有意にNOの産生を抑制した。このNO産生抑制効果と同じ濃度でDY-9760eはA23187によるN1E-115細胞からのLDH(lactate dehydrogenase)の遊離を抑制し、細胞保護効果を示した。さらに、砂ネズミの前脳虚血モデルを用いて神経保護作用と、虚血による海馬でのNO産生に対する効果を検討した。ラット中大脳動脈閉塞モデルと同様に虚血負荷による遅発性神経細胞死をDY-9760eは有意に抑制した。また、マイクロダイアリシス法で海馬内のNO濃度を測定すると、虚血直後、海馬でNO濃度が有意に上昇することが解った。このNO濃度上昇に対してDY-9760eは抑制した。これらのin vitroとin vivoの結果からDY-9760eはカルモデュリン依存性NOSを阻害することによって神経保護作用を示すことが明らかとなった。さらに、神経型、内皮細胞型NOSに対する選択性について検討する必要がある。

DY-9760E是一种新型的钙调蛋白拮抗剂，在体外抑制了各种钙调蛋白依赖性酶。 Shirasaki等。 （Daiichi Pharmaceutical）报告说，它在大鼠中大脑中动脉闭塞模型中显着抑制与缺血相关的神经元死亡。这项研究旨在阐明Dy-9760e的体内动作点，这是一种具有新的作用机理的新型大脑保护剂。研究了钙离子载体A23187在小鼠神经母细胞瘤细胞N1E-115细胞中诱导的无生产的影响。在低于1μm的浓度下，没有显着抑制生产。 Dy-9760E在与NO生产的这种抑制作用相同的浓度下，通过A23187抑制了N1E-115细胞从N1E-115细胞中释放LDH（乳酸脱氢酶），显示了细胞保护作用。此外，我们使用了砂小鼠的前脑缺血模型研究了神经保护作用和缺血对海马中NO产生的影响。与大鼠中大脑中动脉闭塞模型相似，DY-9760E显着抑制了由于缺血性负荷引起的晚期神经元细胞死亡。此外，当使用微透析方法测量海马中未浓度时，发现在缺血后立即在海马中没有显着增加浓度。 DY-9760E因无浓度而被抑制。这些体外和体内结果表明，DY-9760E通过抑制钙调蛋白依赖性的NOS表现出神经保护作用。此外，有必要研究神经和内皮细胞类型NOS的选择性。