天然物由来癌転移抑制物質の研究

天然产物癌症转移抑制剂的研究

基本信息

批准号：
11140280
负责人：
小宮山寛機
金额：
$ 3.2万
依托单位：
Kitasato Institute
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11140280/
关键词：
細胞接着阻害 macrosphelide 血管新生阻害 Str.TI B16 BL6 melanoma 肺転移 SLe^x E-selectin VEGF

项目摘要

癌転移には標的組織の血管内皮細胞と癌細胞との細胞接着因子あるいは転移巣での新生血管等が重要な役割を果たしている。我々は土壌微生物培養液より細胞接着を特異的に阻害する接着阻害物質macrosphelide A (MSA)を単離した。一方、新生血管形成阻害を指標とした血管新生阻害物質の探索により、staurosporine-thiocarbonylimidazole誘導体(Str.TI)にVEGF阻害に基づく強力な血管新生阻害作用を見出した。本研究ではこれらの化合物の癌転移阻害機序を解明すると共に動物癌を用いて臨床応用への可能性を検討した。先ず細胞接着因子の解析を行った結果、LPS活性化4時間後のヒト臍帯静脈血管内皮細胞(HUVEC)へのB16/BL6細胞の接着はMSA及びSLe^x抗体処理により有意に抑制された。しかしながら、ICAM-1抗体、LFA-1抗体処理では抑制されず、また、MSAとSLe^x抗体の併用処理による効果はみられなかった。B16/BL6細胞のマウス肺転移モデルにおいて、隔日でMSAを5-50mg/kg腹腔内投与すると、体重減少を示すことなく肺への転移結節数は用量依存的に抑制された。Str.TIはdosal air sack法による背部皮下での癌性血管新生を抑制し、さらに転移モデルにおいてもStr.TI 10-100mg/kgの投与において用量依存的な転移結節数の抑制を示した。次に、Str.TI 100mg/kgとMSA 50mg/kgを併用した結果、B16/BL細胞移植14日目における転移結節数は90%以上抑制され、著しい転移抑制効果が認められた。MSAの作用機序はB16/BL6メラノーマ細胞上に存在するSLe^xとHUVEC上に発現したELAM-1との結合阻害による細胞接着阻害であり、一方、Str.TIの血管新生阻害作用はVEGF阻害による血管内皮細胞の増殖阻害であった。細胞接着阻害物質MSAと血管新生阻害物質Str.TIとの併用により肺転移が顕著に抑制されたことは、これら化合物が有用な医薬品素材となる事を示唆すると共に血管新生阻害剤と細胞接着阻害剤との併用療法という新たな治療概念を提示したと思われる。

靶组织和癌细胞的血管内皮细胞之间的细胞粘附因子，或转移灶中的新生血管化在癌症转移中起重要作用。我们分离了粘附抑制剂大磷酸酯A（MSA），该抑制剂特别抑制了土壤微生物培养物的细胞粘附。同时，通过使用新血管形成抑制作为指标搜索血管生成抑制剂，我们发现了基于Staurosporine-thiocaronylimidazole衍生物（STR.TI）的VEGF抑制作用的有效的抗血管生成效应。这项研究阐明了这些化合物的癌症转移抑制的机制，并检查了使用动物癌的临床应用的可能性。首先，对细胞粘附因子的分析表明，在LPS激活后，B16/BL6细胞对人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）的粘附通过用MSA和SLE^X抗体的处理显着抑制了LPS激活后的粘附。然而，用ICAM-1抗体和LFA-1抗体进行治疗并未抑制它，并且与MSA和SLE^X抗体的联合处理未观察到影响。在B16/BL6细胞的小鼠肺转移模型中，每隔一天腹膜内进行一次MSA，剂量依赖地抑制了转移性结节的数量，而不会显示体重减轻。 STR.TI使用Dosal空气袋方法抑制了背皮下区域的癌性血管生成，在转移模型中，当施用STR.TI 10-100 mg/kg时，它还显示了剂量依赖性抑制转移性结节的数量。接下来，使用STR.TI 100 mg/kg和MSA 50 mg/kg组合，并且B16/BL细胞移植时第14天的转移性结节数量被抑制超过90％，表明具有显着的转移性抑制作用。 MSA的作用机理是通过抑制B16/BL6黑色素瘤细胞上的SLE^X与HUVEC表达的ELAM-1之间的结合，而STR.TI的血管生成抑制是通过抑制VEGGF的血管内皮细胞的抑制。通过细胞粘附抑制剂MSA和血管生成抑制剂STR.TI的结合，对肺转移的显着抑制作用表明，这些化合物成为有用的药物材料，并且还提出了一种与血管生成抑制剂和细胞粘附抑制剂的联合疗法的新治疗概念。