AhリセプターとP4501A2エンハンサーの相互作用の解析

Ah受体与P4501A2增强子的相互作用分析

基本信息

批准号：
11138209
负责人：
十川和博
金额：
$ 1.86万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11138209/
关键词：
P450 XRE 外来異物コアクチベーター転写因子

项目摘要

ラットチトクロームP4501A2遺伝子のメチルコランスレンによる誘導に必須のエンハンサーを解析し、以下の諸点を明らかにした。1.P4501A2エンハンサーは従来より知られている、外来異物による誘導に反応するエンハンサー、XREとは塩基配列が明らかに異なり、CACGCというXREのコア配列を持たない。そのかわり4bpからなる繰り返し構造が6bp離れて存在した。2.大腸菌で発現したAhリセプターとArntをつかってP4501A2エンハンサーへのAhリセプター/Arntヘテロダイマーの結合を調べたが、結合しなかった。また酵母の発現系でもAhリセプターとArntはP4501A2エンハンサーに結合しなかった。これに反し、XREはこれらの系でAhリセプター/Arntヘテロダイマーと結合した。3.P4501A2エンハンサーに特異的に結合する因子を探索したところ、ヒト肝がん由来のHep3B細胞で見出すことができた。また発現量の多少はあるが、全ての調べた組織で発現していた。この因子は上記の繰り返し構造を認識した。4.P4501A2エンハンサー結合因子はAhリセプター/Arntヘテロダイマーと直接結合することが判明した。またこの結合はArntによって行われていることが推定された。この結果はAhリセプターとArntがコアクチベーターとして作用することを意味する。5.コンピューターによるデータベース検索の結果、このエンハンサーはラットP4501A1遺伝子のプロモーターに存在することがわかり、その活性を調べたところ、P4501A2遺伝子のエンハンサーの約60%の活性を示した。

分析的增强剂对于在ratchtcrome p4501a2基因中的甲基克烯对引导至关重要，揭示了以下几点。 1。P4501A2增强子是清楚的，对异物诱导响应的增强子，XRE显然是不同的，并且没有CACGC XRE核心序列。取而代之的是，存在由4BP组成的重复结构。 2。使用大肠杆菌中表达的Ah reaseptor和ARNT，我检查了AH依赖器与P4501A2增强子的键，但没有结合。同样，在酵母的表达中，AH恢复器和ARNT与P4501A2增强子没有结合。与此相反，XRE在这些系统中与AH reseptor/arnt异二聚体结合使用。 3。探索与P4501A2增强剂结合的因子，可以使用来自人肝癌的Hep3B细胞找到它。尽管有一些表达方式，但在所有组织中都表示。该因素识别上述重复结构。 4.P4501A2增强子结合因子已直接粘结到AH reaseptor/arnt异二聚体。还估计该债券是由ARNT执行的。这意味着AH受体和ARNT充当Co -Star。 5。通过计算机搜索的数据库搜索表明，该增强子存在于大鼠P4501a1基因启动子中，并检查了约60％的P4501A2基因的活性。