アスパラギン結合糖鎖による造血制御機構の解明 -糖転移酵素遺伝子導入による解析-

阐明天冬酰胺连接糖链的造血控制机制 -通过糖基转移酶基因导入进行分析-

基本信息

批准号：
10178207
负责人：
西浦哲雄
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10178207/
关键词：
N-acetylglucosaminyltransferase III GnT III インテグリン N-glycan 造血糖鎖

项目摘要

造血幹細胞の増殖・分化や造血器腫瘍の増殖・臓器特異性(homing)において骨髄微小環境のもとての糖鎖、特にアスパラギン結合糖鎖の意義については不明である。本研究ではアスパラギン結合糖鎖の造血幹細胞の増殖・分化における生物学的意義を明らかにするため、β1-4N-acetyglucosaminyltransferaseIIIGnTIII遺伝子を造血幹細胞や造血細胞株さらに造血ストローマ細胞に導入、発現し、造血細胞の増殖・分化能を検討し、さらにGnTIII糖転移酵素のトランスジェニックマウスに認められる汎血球減少の分子機構を解明し、造血細胞における新たな造血制御機構を解明し、近年造血器腫瘍の治療としての造血幹細胞移植への応用や遺伝子治療への応用を目的とするものである。結果1. GnTIIIトランスジェニックマウスの造血障害の分子機構の解析骨髄微小環境における糖鎖機能を解析する上で有用なモデル動物として糖転移酵素GnTIIIのトランスジェニックマウスがある。このマウスは汎血球減少を来すが、正常マウスとの骨髄移植実験からGnTIIIの発現増強のある骨髄ストローマ細胞に障害があることが明らかとなった。2. GnTIIIトランスジェニックマウスのストローマ細胞の障害分子の同定。GnTIIIトランスジェニックマウスの骨髄ストローマ細胞上の障害分子としてレクチンを用いた糖鎖解析からVCAM-1に着目した。さらにVCAM-1発現CHO細胞に、GnTIII遺伝子を導入し、造血細胞との接着能は有意に低下したことからGnTIIIによる糖鎖はインテグリンVLA4/VCAM-1の相互作用に影響することをはじめて明らかにした。

骨髓微环境中的糖链，特别是天冬酰胺连接的糖链在造血干细胞的增殖和分化以及造血肿瘤的增殖和器官特异性（归巢）中的意义尚不清楚。在本研究中，为了阐明天冬酰胺连接糖链在造血干细胞增殖和分化中的生物学意义，我们将β1-4N-乙酰氨基葡萄糖转移酶IIIGnTIII基因导入并表达到造血干细胞、造血细胞系和造血基质中。细胞。此外，我们还研究了GnTIII糖基转移酶转基因小鼠的增殖和分化能力，阐明了GnTIII糖基转移酶转基因小鼠中观察到的全血细胞减少的分子机制，并阐明了造血细胞中新的造血控制机制，目的是将其应用于造血干细胞。移植和基因治疗。结果1.GnTIII转基因小鼠造血障碍的分子机制分析GnTIII转基因小鼠是分析骨髓微环境中聚糖功能的有用模型动物。这些小鼠出现全血细胞减少症，但对正常小鼠进行的骨髓移植实验显示，GnTIII 表达增强的骨髓基质细胞受到损害。 2.鉴定损伤GnTIII转基因小鼠基质细胞的分子。我们通过使用凝集素进行聚糖分析，重点关注 VCAM-1 作为 GnTIII 转基因小鼠骨髓基质细胞的损伤分子。此外，当将GnTIII基因导入表达VCAM-1的CHO细胞时，与造血细胞的粘附能力显着降低，这首次证明GnTIII诱导的糖链影响整合素VLA4/VCAM-1的相互作用。。