配向制御されたミオシン単分子層での異方的弾性測定と構造変化相関

方向控制肌球蛋白单层中的各向异性弹性测量和结构变化相关性

基本信息

批准号：
10175101
负责人：
須田斎
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Tokai University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では、ミオシンの構造変化の有無を検出することを目的に、自己会合法によってマレイミド基化さた銀薄膜表面上に変異性細胞性粘菌ミオシンSlを単分子層状に配向固定し、ATP加水分解にともなうSlの層厚の変化を表面間力測定装置を用いてサブナノメートル精度で測定し、膜厚の変化として構造変化の有無の検出並びに弾性測定を試みた。その結果、ATP溶液中での平均の膜厚は、9.3nm、一方ATP無し溶液中では、約12.8nmであった。約4nmの構造変化を検出したと考えられる。同時計測されたヤング率は、約1GPa、Stiffnessは、平均5pN/nmであった。弾性係数は、ATPの有無に関係なくほぼ一定の値を示した。また、以前測定した兎骨格筋ミオシンSlとほぼ同じ弾性率であることから、柔らかさは、種に依存しないことが結論づけられた。通常報告されているミオシンヘッドの弾性係数と比較すると、ミオシンの一部を切断したミオシンSlは2〜10倍硬いという有益な結果を得た。研究会発表ならびに論文業績1) 第36回生物物理学会、平岡ら:「自己会合法に基づいて2次元平面上に配向固定された変異性細胞性粘菌ミオシンSlの弾性測定・構造変化検出」、S68。2) 1999年生体運動合同班会議、須田ら:「ミオシンSlの構造変化とそのバネ性」3) H.Suda et.al.:Confornational change and elasticity for the arranged S1-monolayer onto thefunctionalized silver surface.To be submitted in Biophys.J.

在这项研究中，为了检测肌球蛋白的存在或不存在结构变化，突变的细胞粘膜模具SL的定向并固定在单层中的单层中，通过自组装方法在基于马来酰亚胺的银色薄膜的表面上进行，并使用表面层面的构造构造的构图和构造方法的变化来测量SL的层层的变化。弹性。结果，ATP溶液中的平均膜厚度为9.3 nm，而在无ATP溶液中，膜厚度约为12.8 nm。据认为，检测到大约4 nm的结构变化。同时测量的年轻模量约为1 GPA，平均刚度为5 pn/nm。无论ATP的存在或不存在，弹性模量几乎是恒定的。此外，得出的结论是，柔软不是物种依赖的，因为它具有与先前测量的兔骨骼肌肌球蛋白SL几乎相同的弹性模量。与正常报道的肌球蛋白头的弹性模量相比，有益的结果是，部分切断肌球蛋白的肌球蛋白SL较难的2-10倍。演讲和论文1）第36个生物物理社会，Hiraoka等人：“弹性测量和结构变化检测基于自组装方法的二维平面上的突变细胞粘液霉菌肌球蛋白SL的定向”，S68。 2）1999年生物瘤联合小组会议，Suda等人：“肌球蛋白SL及其弹性的结构变化和弹性” 3）H。Suda等人：对官能化的银色表面上布置的S1-OnoLayer的同时变化和弹性。在Biophys中提交。